先天性消化管奇形の発生過程における体軸・体節決定遺伝子の発現に関する胎生学的研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671673
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 下竹 孝志 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (90254341)
• Keywords: 消化管奇形 / 体軸 / 体節 / 胎生学

Research Abstract

Hox-targeted mouse胎仔におけるHox gene群の発現の検索を行なうために胎仔器官形成の組織切片を作成のうえ形態学的検討を行なった。すなわち、各型のHox gene knock out胎仔における器官形成異常を、特に小児外科疾患領域に着目して検討した。椎体、食道、胃、小腸、直腸肛門領域について形態学的に詳細に検討したうえで、さらに遺伝子レベルでの発現異常を検索するためHox gene変異体におけるgene expressionの検索をFISH法を用いて試みた。つまり、胎仔形態について20μm厚の薄切切片を作成し、FITCないしDIGラベルしたHox特異的DNAプローブを用いてmRNAの組織内分布をIn Situ Hybridization法にて顕在化させた。これらの結果に基づき、胎生期におけるHoxの役割を検索する段階に入った。
一方、消化管奇形の家系解析ならびに臨床例におけるhox gene変異の検索を行なうため上記の疾患モデルから得られたHoxの変異パターンの結果を解析し、疾患の発生予防と治療への応用性を検討の上、臨床例での検討を開始した。すなわち、家系の詳細な解析および遺伝形式の検討に入った。現在診療中ないしは術後follow up中の直腸肛門奇形、食道閉鎖症、消化管重複症等計50例に関して椎体異常や家族歴の有無の関点から検討した。PCR(polymerase chain reaction)法による遺伝子の増幅と変異のスクリーニングに入った。

Research Products

• [Publications] Inoue K,Shimotake T,et al.: "Mutational analysis of the RET proto-oncogene in a kindred with MEN 2A and Hirschsprung's disease"Journal of Pediatric Surgery. 34(10). 1552-1554 (1999)
• [Publications] Shimotake T,Inoue K,et al.: "Cell proliferation and apoptosis of enteric ganglia in neonates showing functional bowel obstruction"Surgery in Childhood International. 7(2). 65-68 (1999)
• [Publications] Shimotake T,Go S,et al.: "A homozygous missense mutation in the tyrosine kinase domain of RET in an infant with total intestinal ag."American Journal of Gastroenterology. (in press).
• [Publications] Shimotake T,Go S,et al.: "Ulotrasonographic demonstration of intreuterine intussusception resulting in ileal atresia"Pediatric Surgery International. 16(1). 43-44 (2000)
• [Publications] Inoue K,Shimotake T,et al.: "Mutational analysis of the RET and GDNF genes in children with hypogangl ionosis"European Journal of Pediatric Surgery. (in press).