分子プローブを用いたケロイド・肥厚性瘢痕形成メカニズムの解明

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671680
• Research Institution: Kagawa Medical School
• Principal Investigator: 獅々堀 彊 香川医科大学, 医学部, 助教授 (10033870)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 良二 香川医科大学, 医学部, 教授 (00020917) ; 秦 維郎 香川医科大学, 医学部, 教授 (90164839)
• Keywords: 細胞接着 / Smith-Magenis症候群 / エラスチン / ミクロフィブリル / 36kDa MAGP / 細胞外マトリックス蛋白質 / RGD蛋白質 / アフィニティクロマトグラフィー

Research Abstract

抗アレルギー薬の一種であるトラニラストは、ケロイド・肥厚性瘢痕形成の抑制治療においても有効であるが、その作用機序はコラーゲン合成の抑制など様々に想定されているものの、分子機構については未解明である。ケロイド・肥厚性瘢痕形成を抑制しうる低分子化合物を合成し、これを分子プローブとしてケロイド・肥厚性瘢痕形成のメカニズムを解明することを目的とした。トラニラストを分子プローブとして用いた研究によって、トラニラストの標的蛋白質は36kDa MAGPであることが判明した。
トラニラストをリード化合物とした低分子化合物(分子プローブ)を開発する過程においては、分子プローブをリガンドとしたdrug affinity chromatographyによりCa^<2+>依存性にイソキノリンスルホナマイド誘導体が36kDa MAGPと強い結合活性を示した。この分子は、コラーゲン、エラスチン繊維形成のkey stepに作用しているものと考えられる。
また、細胞接着における36kDa MAGPの役割についても研究した。36kDa MAGPはビトロネクチン等と同様に細胞接着を促進し、末端領域に存在するRGD配列が細胞接着に深く関与しているとの結果を得た。さらに、抗36kDa-MAGP抗体を用いて、免疫組織化学技法(光顕、電顕)によりケロイド・肥厚性瘢痕組織と正常組織とを比較し36kDa-MAGPの組織分布等について検討した。その結果、36kDa MAGPは、elastin-microfibrilと考えられる構造物に局在しており、組織の修復過程において重要な役割をしていることが推定された。

Research Products

• [Publications] Shishibori T.: "Three distinct anti-allergic drugs,amlexanox,cromolyn and tranilast,bind to S100A12 and S100A13 of the S100 protein family." Biochem J.338. 583-589 (1999)
• [Publications] Yamashita K.: "Purification of Bovine S100A12 from Recombinant Escherichia coli." Protein Expr.Purif.(in press). (1999)