2000 Fiscal Year Annual Research Report
Sez12ノックアウトマウスを用いた頭部神経冠細胞の遊走分化に関する研究
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10671714
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
梶原 景正 東海大学, 総合医学研究所, 講師 (00204397)
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| Keywords | DiGeorge症候群 / c-Ets1 / ganglioside / Sez12 / レチノイン酸 |
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| Research Abstract |
1.Sez12プロモータの機能解析
Sez12遺伝子プロモータ活性についてクラゲGFP遺伝子の発現による蛍光シグナルを指標に検討し、Sez12発現には転写開始点より上流260bpが必須であり、その塩基配列には転写因子Sp1・c-Est1の結合ドメインが認められた。c-Ets1は神経冠細胞・脳・胸腺での発現が高く、Sez12mRNAの発現分布と相関が示唆される。またレチノイン酸によりc-Ets1を介してSez12遺伝子発現が誘導された。レチノイン酸代謝異常は頭部顔面領域に発生異常を引き起こすことから、Sez12遺伝子産物により正常な形態形成が維持されることが考えられる。
2.Sez12遺伝子産物に関連するシグナル伝達の解析
Sez12は膜タンパク質をコードし、細胞接着・細胞間相互作用・情報伝達に関わる細胞外ドメインを備えている。そこでアフリカツメガエル卵母細胞にSez12タンパク質を発現させ、情報伝達に関わる糖脂質であるgangliosideをリガンドとして用い、電気生理学的に検討した。未処理卵母細胞gangliosideによる細胞内カルシウムを介したシグナル伝達システムが存在することを確認後、Sez12タンパク質発現卵母細胞でgangliosideの効果を検討したところ、未処理卵母細胞の約3倍大きな内向き電流を認めた。
3.Sez12ノックアウトマウス作製
現在、キメラマウスのgermline transmissionを確認中である。Sez12がDiGeorge症候群発症に関わる遺伝子ならば、相同組換えを起こしたES細胞由来の100%キメラマウスまたはへテロ型ノックアウトで何らかの異常が認められるはずである。現在100%キメラマウスを得ているが形態的・機能的に異常は認められないことから、Sez12がDiGeorge症候群の重篤度に関わる遺伝子という可能性を考えている。
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[Publications] Kengo Tomita: "Gene structure and promoter for Crad2 encoding mouse cisretinol/3alpha-hydroxysterol short-chain dehydrogenase isozyme"Gene. 251. 175-186 (2000)
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[Publications] Kiyoko Kawamura: "The error-prone DNA polymerase zeta catalytic subunit (Rev3) gene is ubiquitously expressed in normal and malignant human tissues"Int.J Oncol.. 18. 97-103 (2001)
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[Publications] Kagemasa Kajiwara: "Sez4 gene encoding an elongation subunit of DNA polymerase zeta is required for normal embryogenesis"Genes to Cells. (印刷中). (2001)
