in situ(RT-)PCR法を応用した歯周ポケット底部接合上皮周辺の病態解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10671968
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 中江 英明 徳島大学, 歯学部・附属病院, 講師 (30227730)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 川崎 有希子 徳島大学, 歯学部, 助手 (60294708) ; 湯本 浩通 徳島大学, 歯学部, 助手 (60284303) ; 吉山 昌宏 徳島大学, 歯学部・附属病院, 講師 (10201071) ; 清水 洋利 徳島大学, 歯学部, 助手 (70294709)
• Keywords: 歯周病関連細菌 / in situ PCR / RT-PCR / 接合上皮 / IL-8 / ICAM-1 / MAPキナーゼ

Research Abstract

歯周病の病態を的確に捉えるためには、歯周ポケット接合上皮周辺の病態、すなわち歯周病関連細菌と接合上皮との関係、さらには上皮から惹起される接合上皮下の結合識との関係を明らかにしなければならない。
歯周病関連細菌Eikenella corrodensは上皮からインターロイキン6やインターロイキン8のような炎症性サイトカインを産生させることを明らかにした。この現象には、E.corrodensが直接的に上皮細胞に付着する必要はなく、E.corrodensの分泌物によっても起こることを明らかにした。
さらに、E.corrodensは上皮細胞に付着することにより、上皮細胞にICAM-1の発現を増強することを明らかにした。これは上記のサイトカインの誘導と異なり、E.corrodens菌体の上皮細胞への付着が必須であり、ICAM-1発現誘導因子は、E.corrodensの付着因子であるレクチン用物質(EcLS)であることを明らかにした。これは、細菌性レクチンが上皮のICAM-1を誘導するという数少ない報告の一つであると自負している。
ついで、E.corrodensが歯肉上皮細胞からcyclooxygenase 2(COX-2)の発現増強やプロスタグランジンE2の産生を増強することを明らかにした。これらの因子の発現には、E.corrodensが直接上皮細胞に付着しなくても生じること、すなわちE.corrodensが分泌する可溶化物質によるものであることを明らかにした。さらにこの物質の性状を探求していくと、未知の分子量10kDa以下の低分子量物質であることをつきとめた。
最後に、ICAM-1、炎症性サイトカインの上皮での産生機構を明らかにするために、E.corrodensが上皮に付着することにより生じる上皮細胞内のシグナル伝達機構の解明を試みた。Neisseriaなどでいわれているように、ICAM-1におけるE.corrodensによるシグナル伝達は阻害実験の結果、p38やp42/44MAPキナーゼが関与している系であることが明らかになった。

Research Products

• [Publications] 藤中 恵子 他: "ヒト感染根管における侵入細菌の局在に関する免疫組織学的解析"日本歯科保存学雑誌. 43(印刷中). (2000)
• [Publications] 松尾 敬志 他: "歯科領域での抗菌剤の投与"医薬ジャーナル. 35. 1791-1798 (1999)
• [Publications] 中江 英明 他: "歯学生のための歯内療法学"歯の外傷の治療法(印刷中). (2000)