2000 Fiscal Year Annual Research Report
活性制御領域の構造を持つ合成ペプチドによるMAPキナーゼ情報伝達経路の制御
| Project/Area Number |
10680583
|
|---|
| Research Institution | Kobe University |
|---|
Principal Investigator |
トクマコフ アレクサンドル 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 助手 (20301278)
|
|---|
| Keywords | MAPキナーゼ / 細胞分裂 / ゼノパス / サイクリングエキストラクト / カルシウム |
|---|
| Research Abstract |
MAPキナーゼ阻害ペプチド(MIP)が試験管内、およびインビボ実験系において有効であることを示した前年度までの結果をふまえ、細胞周期調節におけるMAPキナーゼ経路/Ca^<2+>イオンの機能連関に焦点を絞った解析を行い、以下の結果を得た。1)ゼノパス卵サイクリングエキストラクトにおけるCa^<2+>オシレーションの同定:ゼノパス卵のサイクリングエキストラクトがその細胞周期進行と同調してCa^<2+>濃度変動を繰り返す現象(Ca^<2+>オシレーション)を見いだした。その振幅(約100nM)はCdc2キナーゼやMAPキナーゼが活性化を受ける直前の分裂前中期に最大となり、間期に最小となった。またオシレーションのCa^<2+>源は顆粒分画に含まれる細胞内小胞と推定された。2)サイクリングのCa^<2+>依存性の証明:Ca^<2+>キレート剤が、サイクリングエキストラクトにおける細胞分裂を3つの異なる段階(細胞核の形態やCdc2キナーゼ・MAPキナーゼの活性状態で区別される)で遮断することを見いだした。これらの結果は、PD098059やMIPがサイクリングエキストラクトでの分裂期短縮〜スピンドルアセンブリチェックポイントの消失/減弱〜を起こしたことと同様に、MAPキナーゼが細胞周期調節に関与することを示したものである。
そのほかの関連する研究として、MAPキナーゼのチロシン脱リン酸化/不活性化を指標にしてゼノパス卵の受精シグナル伝達の解析を行っている。本年度はチロシンキナーゼ〜ホスホリパーゼCγ経路が受精に伴う卵活性化に必要であることを見いだした。
|
-
[Publications] Tokmakov,A.A.: "Deregulation of mitogen-activated protein kinase at low pH due to a structural rearrangement of activation segment."Biochim.Biophys.Acta. 1476. 66-74 (2000)
-
[Publications] Sato,K.-I.: "Fertilization signalling and protein-tyrosine kinases."Comp.Biochem.Physiol.Part B. 126. 129-148 (2000)
-
[Publications] Sato,K.-I.: "Tyrosine kinase-dependent activation of phospholipase C-gamma is required for calcium transient in Xenopus egg fertilization."Dev.Biol.. 224. 453-469 (2000)
-
[Publications] Sato,K.-I.: "Adaptor protein Shc undergoes translocation and mediates up-regulation of the tyrosine kinase c-Src in EGF-stimulated A431 cells."Genes to Cells. 5. 749-764 (2000)
-
[Publications] Sato,K.-I.: "Regulation of Xenopus oocyte maturation, egg fertilization, and embryogenesis by protein-tyrosine phosphorylation."Current Topics in Biochemical Research. 2. 91-102 (2000)
-
[Publications] Sato,K.-I.: "Hydrogen peroxide induces Src family tyrosine kinase-dependent activation of Xenopus egg."Develop.Growth Differ.. 43. 55-72 (2001)
-
[Publications] Tokmakov,A.A.: "Calcium oscillations in Xenopus egg cycling extracts."J.Cell.Biochem.. (in press). (2001)
