1999 Fiscal Year Annual Research Report
糖転移酵素のゴルジ装置停留に関わる分子種の同定と解析
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10680590
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Research Institution | Soka University |
Principal Investigator |
西原 祥子 創価大学, 生命科学研究所, 助教授 (00164575)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
成松 久 創価大学, 生命科学研究所, 教授 (40129581)
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Keywords | 糖転移酵素 / ゴルジ膜 / フコース転移酵素 |
Research Abstract |
ゴルジ装置に局在している糖転移酵素はすべて2型の膜蛋白質であり、細胞質側にN末を、ゴルジ内腔側に酵素活性を担うC末を向けている。糖転移酵素のゴルジ停留機構の解明を目的とし、酵素をゴルジ装置のどの位置に停留させるかを決めているゴルジレセプター分子(GRP)の候補を、酵母two hybrid systemによりスクリーニングした。 bait側として、H酵素、Se酵素などのフコース転移酵素をはじめとするヒト非癌部右半結腸粘膜で発現している各種糖転移酵素のcoding領域全長、及び、酵素活性部位、膜貫通部位と細胞質尾部をDNA Binding Domain vector pDBLeuに組み込んだ。prey側としては、手術材料として得たヒト非癌部右半結腸粘膜よりcDNAを合成し、GAL4 Activation Domain vector pPC86に組み込み、150万個のindependent cloneを持つcDNAライブラリーを作製した。H酵素全長をbaitとして、スクリーニングを行ったところ、約40個の弱い相互作用を示すクローンが得られが、強い相互作用を示すクローンは得られなかった。糖転移酵素とGRPの相互作用は、弱い相互作用が主なのかもしれない。各クローンのシークエンスを行ったところ、未知の分子を含む数個のGRP候補が得られ、現在、さらなる解析を行っている。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Nishihara,S.et al.: "Molecular mechanisms of expression of Lewis b antigen and other type I Lewis antigens in human colorectal cancer."Glycobiology. 9. 607-616 (1999)
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[Publications] Issiki,S.et al.: "Cloning expression and characterization of a novel UDP-galactose:β-N-acetyl-glucosamine β1,3-galactosyltransferase (β3Gal-T5) responsible for synthesis of type 1 chain in colorectal and pancreatic epithelia and tumor cells derived there from."J.Biol.Chem.. 274. 12499-12507 (1999)
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[Publications] Kaneko,M.et al.: "α1,3-fucosyltransfer ase IX (Fuc-TIX) is very highly conserved between human and mouse;Molecular cloning,characterization and tissue distribution of human Fuc-TIX."FEBS Lett.. 453. 237-242 (1999)
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[Publications] Togayachi,A.et al.: "Upregulation of Lewis enzyme (Fuc-TIII) and plasma-type α1,3-fucosyl-transferase (Fuc-TVI) expression determines the augmented expression of sialyl Lewis x antigen in non-small cell lung cancer."Int.J.Cancer. 83. 70-79 (1999)
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[Publications] Ikehara,Y.et al.: "Cloning and expression of a human gene encoding an N-acetyl-galactosamine-α2,6-sialyltransferase (ST6GzINAcl) which is a candidate for synthesis of cancer-associated sialyl-Tn antigens."Glycobiology. 9. 1213-1224 (1999)
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[Publications] Nishihara,S.et al.: "α1,3-fucosyltransferase 9 (FUT9;Fuc-TIX) preferentially fucosylates the distal GlcNAc residue of polylactosamine chain while the other four α1,3FUT members preferentially fucosylate the inner GlcNAc residue."FEBS Lett.. 462. 289-294 (1999)