1998 Fiscal Year Annual Research Report
CrkのSH3領域結合分子DOCK180の機能解析
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10770106
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
清川 悦子 国立感染症研究所, 感染病理部, 研究員 (80300929)
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| Keywords | Crk / DOCK180 / SH3 |
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| Research Abstract |
癌遺伝子産物CrkのSH3領域に結合するDock180蛋白の機能解析を行った。DOCK180はC末側にCrk結合領域をN末側にSH3領域を有するものの、それ以外には明らかなドメインを有さず、その生化学的機能は不明である。われわれは、Crkなどのアダプター分子が細胞質内の酵素を細胞膜近傍に局在を変化させることにより情報伝達を司るということを見出しており、このことを利用してDOCK180の機能解析を行った。すなわち、DOCK180のカルボキシル末端側にファルネシル基付加シグナルをつけ、これによりDOCK180をCrk非依存性に細胞膜へ移行できるようにした。その結果、DOCK180が細胞膜へ移行すると、NIH 3T3細胞の偏平化を誘導することを見出した。この細胞の偏平化は低分子量GTP結合蛋白RacとCdc42の活性化型を導入した細胞の形態と非常に類似していた。しかも、DOCK180はRacやCdc42同様にJun Kinase(JNK)を活性化した。また、優勢劣性型RacやCdc42はDOCK180によるJNK活性化を阻害した。さらに、DOCK180を共発現するとPacのGTP型が著明に増加することがわかり、DOCK180はRaCの上流制御因子であることが明らかになった。さらに、我々はDOCK180がRacにEDTA存在下においてのみRacに結合することを見出した。このことは、ヌクレオチドに結合していないRacのみがDOCK180に結合することを示しており、DOCK180が直接にPacを活性化することが強く示唆された。4
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[Publications] E kiyokawa,et al.: "Activation of Pac 1 by a Crk SH3-binding protein,DOCK180." Genes & Development. 12. 3331-3336 (1999)
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[Publications] E Kiyokawa,et al.: "Evidence that DOCK180 up-regulat es signals from the CrkII-p130^<cas> complex." J.Biol.Chem.273. 24479-24484 (1998)
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[Publications] E Kiyokawa,et al.: "Pole of Crk oncogene product in physiologic signaling." Crit.Pev.in Oncogenesis. 8(4). 329-342 (1997)
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[Publications] H.Hasegawa,et: "DOCK180,a major CRK-SH3-binding protein,alters cell morphology upon translocation to the membrane." Molecular and Cellular Biology. 16(4). 1770-1776 (1996)
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[Publications] S.Takai,et al.: "Chromosomal mapping of the gene encoding DOCK180,a major Crk-binding protein,to 10q26.13-q26.3 by fluorescence in sit u hybridization." Genomics. 53. 403-404 (1996)
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[Publications] E.Kiyokawa,et al.: "Overexpression of EPK,an EPH family receptor protein tyrosine kinase,in various human tumors." Cancer Pesearch. 54. 3645-3650 (1994)
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[Publications] Y.-Y.Xiang,et al.: "Isolation of complementary DNA encoding K-cadherin,novel rat cadherin preferentially expressed in fetal kidney and kidney carcinoma." Cancer Pesearch. 54. 36-45 (1994)
