1998 Fiscal Year Annual Research Report
HPLC/タンデムMSによるドーピング薬物の迅速高感度検出法の確立
| Project/Area Number |
10770188
|
|---|
| Research Institution | Nagoya University |
|---|
Principal Investigator |
石井 晃 名古屋大学, 医学部, 助教授 (30252175)
|
|---|
| Keywords | 高速液体クロマトグラフィー / ドーピング / 利尿剤 / フロセミド / 固相抽出 |
|---|
| Research Abstract |
薬物乱用問題は、乱用される薬物に関しても乱用者のプロフィールについても多様化しており、ドーピングでも同様の傾向が認められる。現在IOCで禁止薬物のリストに挙げられているのは、興奮剤、麻薬鎮痛剤、蛋白同化ステロイド、利尿剤、β-刺激剤やβ-遮断剤等多岐にわたり、各項目についても多種多様な薬物が含まれる。これらの内、利尿剤は体重を減少させるためや他の薬物を隠蔽するために使用されることが多い。
当該研究の研究代表者は昨年8月に所属が変わり、液体クロマトグラフィー(LC)/タンデムマススペクトロメトリー(MS/MS)及びセミミクロLCの使用ができず、今回は通常のLCシステムを使用し、酸性利尿剤のフロセミド(FURO)とハイドロクロロサイアザイド(HCTZ)の尿中からの回収について検討した。固相抽出は、体液からの薬物の精製に広く用いられており、今回我々もこの方法を用いた。まず、各2.5μgのFUROとHCTZを含む1mlの尿に8mlの蒸留水とlmlのlN HClを加え、洗浄したBondElut C_<18>カラムに加え、20mlの蒸留水で洗浄し、3mlのクロロフォルム/メタノール(9:1)で溶出し,蒸発乾固した後に250μlのメタノールに溶解してその10μlをLCに注入した。LCの条件は以下の通りである。移動相は10mM CH_3COOH/CH_3CN(60:40)で流速は0.5ml/min、UV検出器を用い270nmで検出した。BondElut C_<18>による固相抽出でFUROの回収率は130%だったが、HCTZは10%以下であった(n=4)。弱イオン交換樹脂のBondElut NH_2を用いてもFUROは良好に回収された(回収率95.4%,n=4)がHCTZは殆ど回収されなかった。これはHCTZの比較的高い親水性が関与していると考えられ、今後は親水性の高い利尿剤の固相抽出の最適条件を検討する予定である。
|
-
[Publications] Guan,F.: "Solid-phase microextraction(SPME) and GC-ECD of benzophenones for detection of benzodiazepinesin urine" J.Anal.Toxicol.in press. (1999)
-
[Publications] Ishii,A.: "Determination of cyanide in whole blood by capillary gas chromatography with cryogenic oven trapping" Anal.Chem.70. 4873-4876 (1998)
-
[Publications] Hattori,H.: "Sensitive determination of xylenes in whole blood by capillary gas chromatography with cryogenic trapping" J.Chromatogr.B.718. 285-289 (1998)
-
[Publications] Guan,F.: "Headspace solid-phase microextraction and gas chromatographic determination of dinitroaniline herbicides in human blood,urine and environmental water" J.Chromatogr.B.714. 205-213 (1998)
-
[Publications] Lee,X.-P.: "Improved extraction of ethanol from human body fluids by headspace solid-phase microextraction with a Carboxen-polydimethylsiloxane-coated fiber" Chromatographia. 47. 593-595 (1998)
-
[Publications] Watanabe,K.: "Sensitive determination of ethyl ether in whole blood by capillary gas chromatography with cryogenic trapping" Jpn.J.Forensic Toxicol.16. 69-74 (1998)
