1998 Fiscal Year Annual Research Report
Bcl-2ホモロジードメイン3(BH3)を介したアポトーシス制御に関わる細胞性因子の同定とその機能解析
| Project/Area Number |
10780450
|
|---|
| Research Institution | National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East |
|---|
Principal Investigator |
北中 千史 国立がんセンター, 研究所・生物物理部, 室長 (70260320)
|
|---|
| Keywords | アポトーシス / プログラム細胞死 / Bcl-2 / BH3ドメイン / MycL2 |
|---|
| Research Abstract |
BH3ドメインを介するアポトーシス制御の分子機構を理解する目的で、悪性神経膠腫(グリオーマ)細胞に対して強力なアポトーシス誘導能を発揮するMycファミリー蛋白質MycL2に存在しBH3様モチーフを有するアポトーシス増強ドメイン(DcathEnhancer/Augmention Domain:DEAD)に結合する細胞性因子のyeast two-hybrid systemによる単離、同定を試みた。MycL2のDEADをbaitとしてヒト胎盤由来のcDNAライブラリーをスクリーニングし、得られた陽性cDNAクローンのなかからあらためてtwo-hybridanalysisによりMycL2アポトーシス増強ドメインに特異的に結合するもの(真性陽性クローン)を選びだし、塩基配列を決定した。その結果真性陽性クローンは2種類の遺伝子に由来することが判明した。ひとつはRNAスプライシングを触媒するスプライソソームの構成成分であるSmD3であり、もうひとつは解糖系酵素であるトリオースリン酸イソメラーゼ(TPI)であった。それぞれについてin vitro bindingアッセイ,哺乳動物細胞を用いたcoimmunoprecipitationアッセイによってMycL2との結合を調べたところ、SmD3に関しては両アッセイにおいて結合が確認され、TPIはin vitroでの結合が確認された。SmD3はSMN(Spinal Muscular Atrophyの原因遺伝子産物)との結合を介して、また、TPIはポリグルタミン(ポリグルタミン性神経変性疾患の原因とされる)との結合を介して神経系細胞の細胞死の制御における役割が示唆されており、現在MycL2によるグリオーマ細胞の細胞死誘導にこれらの因子がどのように関わっているかを検討している。
|
-
[Publications] Kitanaka C: "Caspase-independent programmed cell death with necrotic morphology" Cell Death and Differentiation. (印刷中). (1999)
-
[Publications] Kitanaka C: "Oncogenic Ras triggers cell suicide through the activation of a caspase-independent cell death program in human cancer cells" Oncogene. (印刷中). (1999)
-
[Publications] Sugiyama A: "Molecular cloning and chromosomal mapping of mouse intronless myc gene acting as a potent apoptosis inducer" Gene. 226. 273-283 (1999)
-
[Publications] Mishima K: "Heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor stimulates mitogenic signaling and is highly expressed in human malignant gliomas" Acta Neuropathologica. 96. 322-328 (1998)
