1998 Fiscal Year Annual Research Report

慢性関節リウマチ滑膜増殖に関わる新規蛋白質のcDNA法によるクローニング

Research Project

Project/Area Number	10877081
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	尾崎承一京都大学, 医学研究科, 講師 (00231233)
Keywords	慢性関節リウマチ / 滑膜増殖 / サブトラクション / cDNA・RDA / PCR / 変形性関節症 / テスター / ドライバー
Research Abstract	慢性関節リウマチ(RA)は慢性破壊性増殖性滑膜炎を特徴とする自己免疫疾患であり、滑膜増殖の機序の全貌を解明しこれを制御することは診断・治療法を確立する上で重要である。本研究はサブトラクション法を用いて、RAの滑膜には強く発現するが他の非増殖性滑膜炎には発現しない蛋白質を検索することにより、RA滑膜の増殖機序に深く関与する新規の分子を同定することを目的としている。サブトラクション法として汎用されているcDNA・RDA法は、サブトラクテイブハイブリダイゼーションとPCRを基盤として、一方のcDNA群(テスター)に存在し他方のcDNA群(ドライバー)にはないcDNA断片を動的に濃縮する効率の良い手法であり、滑膜増殖機序の全貌をとらえるという本研究に適当であると考え採用した。本研究では、テスターとして複数のRA患者由来の滑膜細胞から得たmRNAより作成したcDNAを、ドライバーとして変形性関節症などの非増殖性関節炎の複数の患者滑膜由来のmRNAより作成したcDNAを用い、両者間でcDNA-RDA法を行い、テスターにのみ選択的に認められるcDNA断片をクローニング・解析する計画である。この計画に基づき、本年度には以下の研究を進めた。 (1) 複数のRA患者から手術(滑膜切除術および人工関節置換術)時に得られた滑膜組織からmRNAを採取し均等に混合してテスターを作成した。一方、非増殖性関節炎(変形性関節症)の手術時に得られた滑膜組織からmRNAを採取し均等に混合してドライバーを作成した。 (2) 抗CD3抗体で活性化したCD4+T細胞クローンと無刺激の同細胞との間でcDNA-RDA法を施行し、活性化した際に特異的に発現誘導される新規蛋白質を得て解析を進め、この予備的実験により設備および技術面における本手法の実現可能性を確認した。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Sobajima J.,OzakiS.,et al.: "Prevalence and characterization of P-ANCA directed against HMG1 and HMG2 in ulcerative colitis." Clin.Exp.Immunol.111・2. 402-407 (1998)
[Publications] Uesugi H.,OzakiS.,et al.: "Prevalence and characterization of P-ANCA antibodies to the high mobility group non-histone chromosomal proteins HMG1 and HMG2,in systemic rheumatic diseases." J.Rheumatol.25. 703-709 (1998)
[Publications] Tnaka M.,OzakiS.,et al.: "Cloning of follistatin-related protein(FRP)as a novel autoantigen in systemic rheumatic diseases." Int.Immunol.10・9. 1305-1314 (1998)
[Publications] Shinkura N.,Ozaki S.,et al.: "Autoantibodies to FK506 binding protein 12(FKBP12)in autoimmune diseases." Autoimmunity. (発表予定).
[Publications] Sobajima J.,OzakiS.,et al.: "High mobility group non-histone chromosomal proteins HMG1 and HMG2 are significant target antigens of perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in autoinnune hepatitis." Gut. (発表予定).
[Publications] 尾崎承一(共著): "自己免疫でおこる難治性疾患-実地医家のための最新情報-" 医薬ジャーナル社(東京)、坂根剛・編, 267
[Publications] 尾崎承一(共著): "外来診療のすべて(改訂第2版)" メディカルビュー社(大阪)、高久史麿・総監修, 911

1998 Fiscal Year Annual Research Report

慢性関節リウマチ滑膜増殖に関わる新規蛋白質のcDNA法によるクローニング

Principal Investigator

尾崎 承一 京都大学, 医学研究科, 講師 (00231233)

Research Products

[Publications] Sobajima J.,OzakiS.,et al.: "Prevalence and characterization of P-ANCA directed against HMG1 and HMG2 in ulcerative colitis." Clin.Exp.Immunol.111・2. 402-407 (1998)

[Publications] Uesugi H.,OzakiS.,et al.: "Prevalence and characterization of P-ANCA antibodies to the high mobility group non-histone chromosomal proteins HMG1 and HMG2,in systemic rheumatic diseases." J.Rheumatol.25. 703-709 (1998)

[Publications] Tnaka M.,OzakiS.,et al.: "Cloning of follistatin-related protein(FRP)as a novel autoantigen in systemic rheumatic diseases." Int.Immunol.10・9. 1305-1314 (1998)

[Publications] Shinkura N.,Ozaki S.,et al.: "Autoantibodies to FK506 binding protein 12(FKBP12)in autoimmune diseases." Autoimmunity. (発表予定).

[Publications] Sobajima J.,OzakiS.,et al.: "High mobility group non-histone chromosomal proteins HMG1 and HMG2 are significant target antigens of perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in autoinnune hepatitis." Gut. (発表予定).

[Publications] 尾崎承一(共著): "自己免疫でおこる難治性疾患-実地医家のための最新情報-" 医薬ジャーナル社(東京)、坂根剛・編, 267

[Publications] 尾崎承一(共著): "外来診療のすべて(改訂第2版)" メディカルビュー社(大阪)、高久史麿・総監修, 911

尾崎承一京都大学, 医学研究科, 講師 (00231233)