1998 Fiscal Year Annual Research Report
流れ負荷時の培養内皮細胞内α-アクチニンの実時間挙動解析
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10877105
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
佐藤 正明 東北大学, 大学院工学研究科, 教授 (30111371)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
片岡 則之 川崎医療短期大学, 医用電子技術科, 講師 (20250681)
松本 健郎 東北大学, 大学院工学研究科, 助教授 (30209639)
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| Keywords | 内皮細胞 / アクチンフィラメント / せん断応力 / GFP / α-アクチニン / 力学的刺激 |
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| Research Abstract |
当初の予定にしたがって,GFP(Green Fluorescent Protein)の遺伝子を利用して生細胞中でのアクチン線維の動的挙動を観察する目的で研究を行い,以下の結果を得ている.
1. 内皮細胞内へのGFP遺伝子の導入条件を検討し,生細胞内での蛍光発現を確認することができた.
2. GFP-α-アクチニンベクターを作製し,内皮細胞内へ導入することにより,蛍光発現を確認した.この同一細胞を固定後,従来法であるローダミンファロイジンによる染色によって,アクチンフィラメントの染色と比較したところ,同一の形態パターンを示し,所期の目的が達成されていることが確認された.
3. 流れ負荷状態で生細胞内のα-アクチニンの挙動観察を行ったところ,細胞の形状変化に伴って細胞骨格が形を変えていることが観察できた.ただし,レーザ顕微鏡による観察ができなかったため,従来の蛍光顕微鏡にCCDカメラを取り付けたシステムを利用して観察した.その結果,十分な空間分解能が得られず,詳細な解析までには至らなかった.
4. 研究途中で,アクチンとGFPの遺伝子を融合したベクターを入手することができ,現在は主としてこのベクターを用いた研究に切り換えている.このベクターによるアクチンフィラメントの可視化においても,これまでのα-アクチニンを用いた結果と同様の結果を得ており,さらにレーザ顕微鏡のもとで明瞭な像が得られるように工夫を重ねている.
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[Publications] 片岡則之: "力学的刺激と内皮細胞骨格構造の変化" 日本バイオレオロジー学会誌. 12・4. 234-246 (1998)
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[Publications] 片岡則之: "せん断応力負荷の初期過程における培養内皮細胞の形態およびF-アクチンフィラメントの変化" 日本機械学会論文集(B編). 64-622. 1801-1808 (1998)
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[Publications] 片岡則之: "流れの方向変化が培養内皮細胞の形態に及ぼす影響-流れの方向変化の時間間隔の影響-" 医用電子と生体工学. 36-3. 302-308 (1998)
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[Publications] 武田浩一郎: "培養動脈組織片を用いた内皮細胞の流れに対する形態的反応の検討" 医用電子と生体工学. 36-3. 293-301 (1998)
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[Publications] Kataoka, N.: "The effect of flow direction on the morphological responses of cultured bovine aortic endothelial cells" Medical & Biological Engineering & Computing. 36-1. 122-128 (1998)
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[Publications] Kataoka, N.: "The morphological responses of cultured bovine aortic endothelial cells to fluid-imposed shear stress under sparse and colony conditions" JSME International Journal Series C. 41-1. 76-82 (1998)
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[Publications] Kataoka, N.: "How do flow directions affect the morphology of cultured endothelial cells?-In relation to the blood flow condition at atherosclerotic regions-" Proc. of The 10th International Conference on Mechanics in Medicine and Biology. 133-136 (1998)
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[Publications] Kataoka, N.: "Effects of cell-cell and cell-substrate contacts on the response of cultured endothelial cells to fluid shear stress" Proc of the 5th JUSSC Conf of Biomech. 54-55 (1998)
