肝細胞癌における腫瘍ワクチンおよびTRAILを用いた腫瘍特異的遺伝子治療

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10877189
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 柳衛 宏宣 東京大学, 医科学研究所, 助手 (30212278)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 野中 泰政 東京大学, 医科学研究所, 医員 ; 吉崎 巌 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70200970) ; 杉山 弘高 愛知医科大学, 医学部, 講師 (70242112)
• Keywords: 免疫遺伝子治療 / 樹状細胞 / 補助刺激分子 / 細胞融合 / 腫瘍抗原特異的キラーT細胞 / 腫瘍ワクチン / TRAIL

Research Abstract

細胞性免疫応答調節に関与するとされるB7-1分子をマウス肝細胞癌 Hepal-6(H-2^b)にlipofectionによりマウスB7-1遺伝子を導入し、B7-1分子を発現させたtransfectant(L1)を作製した。さらに、transfectantL1を腹腔内に免疫した同系マウス牌臓細胞より、Hepal-6特異的CD8^+、class I MHC(D^b)分子拘束性CTL lineを樹立し、^<51>Cr releasingassayによる傷害活性を測定した。樹立したCTLは正常肝細胞をほとんど傷害せず、Li、Hepal-6を同程度に傷害排除する一方、他の同系腫瘍細胞に対する傷害活性は見られなかった。現在、Hepal-6特異的CTLが、Hepal-6表面のclass I MHC(D^b)分子内より提示されたpeptideを認識するかMild acid elution methodにより、抗原peptideを分離し、RP-HPLCにより分両分離し、peptideの特性を解析中である。さらに、CTLが異なる同系肝細胞癌株も認識するかCr releasing assayにて確認し、肝細胞癌共通抗原epitopeを含んでいるかどうか検討中である。
マウスのDC細胞に関しては、牌臓細胞、骨髄細胞より、RBCを除きnonT、 nonBをGM-CSF/IL-4などを用いて分離採取を試みている。B7-1分子を発現させたtransfectant(Ll)とDC細胞との細胞融合を検討中である。