1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10877249
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
高橋 公太 新潟大学, 医学部, 教授 (90101857)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
冨田 善彦 新潟大学, 医学部附属病院, 講師 (90237123)
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| Keywords | アポトーシス / 腎移植 / オリゴペプチド |
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| Research Abstract |
1. 293cellにおけるアポトーシスの誘導
胎児腎尿細管由来の細胞株である293細胞について以下のアポトーシス刺激に対する感受性を検討した。
a. 抗Fas抗体
抗Fas抗体のうちlgMクラスに分類され、Fas抗原のintegrationを行うことのできるCH-11によるアポトーシス誘導の有無を検討したところ、293細胞にはアポトーシスは誘導できなかった。
次に、抗Fas抗体のアポトーシス誘導を増強することが知られているインターフェロンガンマーの処理を行ったが、やはりアポトーシスは誘導されなかった。
b. TNF-alpha
TNF-alphaもアポトーシスを誘導することが知られている。293細胞を標的としてTNF-alphaのアポトーシス誘導能を検討した。種々の濃度で作用させたが、アポトーシスは見られなかった。
2. Fas発現ベクターの作成と293細胞への遺伝子導入
a. RT-PCRによるFas遺伝子の単離および増幅
Jurkat細胞より分離したRNAより、cDNAを作成した。これを鋳型としてヌクレオチドのmisincorporationの少ないエキソヌクレアーゼ活性を持つ耐熱性DNAポリメラーゼでPCRを行なった。
b. FasのPCR生成物の発現ベクターへの組み込み
現在進行中である。
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