オリゴペプチドによる移植腎拒絶の回避の基礎的検討-アポトーシス誘導酵素阻害ペプチド利用の可能性-

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10877249
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 高橋 公太 新潟大学, 医学部, 教授 (90101857)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 冨田 善彦 新潟大学, 医学部, 助教授 (90237123)
• Keywords: アポトーシス / 腎移植 / オリゴペプチド

Research Abstract

1.293cellにおけるアポトーシスの誘導
胎児腎尿細管由来の細胞株である293細胞について以下のアポトーシス刺激に対する感受性を検討した。
(1)抗Fas抗体によるアポトーシスの誘導
抗Fas抗体のうちIgMクラスに分類され、Fas抗原のintegrationを行うことのできるCH-11によるアポトーシス誘導の有無を検討したが、293細胞にはアポトーシスは誘導できなかった。
(2)インターフェロンガンマー処理
抗Fas抗体のアポトーシス誘導を増強することが知られているインターフェロンガンマーの処理を行ったが、やはりアポトーシスは誘導されなかった。
(3)TNF-alpha
TNF-alphaもアポトーシスを誘導するが,293細胞を標的としてTNF-alphaのアポトーシス誘導能を検討した。種々の濃度で作用させたが、アポトーシスは見られなかった。
2..Fas発現ベクターの作成と293細胞への遺伝子導入
(1)RT-PCRによるFas遺伝子の単離および増幅
Jurkat細胞より分離したRNAより、cDNAを作成した。これを鋳型としてRT-PCRを行なった。
(2).FasのPCR生成物の発現ベクターへの組み込み
発現ベクターへの組み込みを行い,この遺伝子配列を特定した.今後,このベクターを293細胞に遺伝し導入する予定である.