1998 Fiscal Year Annual Research Report

神経変性疾患と悪性腫瘍の分子医学

Research Project

Project/Area Number	10CE2006
Research Category	Grant-in-Aid for COE Research
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	高橋雅英名古屋大学, 医学部, 教授 (40183446)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	浜口道成名古屋大学, 医学部, 教授 (90135351) 古川鋼一名古屋大学, 医学部, 教授 (80211530) 祖父江元名古屋大学, 医学部, 教授 (20148315) 村松喬名古屋大学, 医学部, 教授 (00030891)
Keywords	神経変性疾患 / 悪性腫瘍 / 癌転移 / 神経栄養因子 / RET遺伝子 / ミッドカイン / 糖鎖合成酵素遺伝子 / トランスジェニックマウス
Research Abstract	1. 神経変性疾患発症に関わる機能分子の同定 (1) アルツハイマー病(AD)の大脳皮質および筋萎縮性側索硬化症(ALS)の脊髄前角の病変組織を用いた分子インデックス法による遺伝子発現プロファイル作成を完了し、各々の疾患と正常対照間で比較検討した。ADについてはAD脳特異的に検出されたcDNAフラグメントを31個、正常対照脳特異的cDNA63個の合計94個の遺伝子を得た。ALSについては現在までに84個のcDNAを選択し、ALS前角特異的cDNAは46個、正常対照前角特異的cDNAは38個であった。現在これらの塩基配列の解析と、それぞれの疾患における病変組織と正常組織における発現動態をノーザンプロット法および定量RT-PCR法で検討中である。(祖父江) (2) 神経栄養因子GDNFは種々の神経細胞の生存、分化に極めて重要な役割を果たしていることが知られている。GDNFにより発現が誘導され、神経分化に重要な遺伝子を明らかにするため、ヒト神経芽細胞腫細胞を用いてDiffrential Display法を用いて発現遺伝子の解析を行った。神経芽細胞腫細胞をGDNF未処理群と2時間処理群で比較検討した結果、処理群のみに認められる約80の特異的バンドを検出し、塩基配列を決定した。現在その発現をノーザンブロット法および定量RT-PCR法で検討中である。(高橋) (3) ヘパリン結合性神経栄養因子ミッドカイン(MK)のレセプターを同定する目的で、細胞表面のMK結合蛋白を探索した結果、約400kDaのりん酸化蛋白を同定した。ミッドカインのレセプターの候補として、この400kDa蛋白の大量精製を開始し、部分アミノ酸配列を決定しつつある。(村松) (4) 酸性糖脂質糖鎖による細胞増殖、分化シグナルの制御機構の解析のため、GD3合成酵素遺伝子とGM1/GD1b/GA1合成酵素遺伝子の2種の糖転移酵素遺伝子を各々ラット褐色細胞腫細胞PC12に導入し、糖鎖リモデリングを行った。その結果、前者ではPC12細胞の増殖促進を、後者ではNGFによる分化誘導に対する不応性を獲得することが判明し、糖鎖リモデリングが神経系細血の分化、増殖の制御に関わることを明らかにした。(古川) 2. 癌の増殖、浸潤、転移の分子機序とその制御 (1) 多発性内分泌腫瘍症(MEN)2A型、2B型および家族性甲状腺髄様癌(FMTC)のRET遺伝子の変異による発症メカニズムの解明を進めた。今年度は特にMEN2BあるいはFMTCのいずれかを発症する5つのチロシンキナーゼドメインの変異に焦点を当てて解析を行った。その結果、これらの変異は生物学的、生化学的活性により2つのグループに分類され、それぞれMEN2B型とFMTCの臨床像と密接に関連していることを明らかにした。(高橋) (2) 卵巣癌の腹膜転移活性化の分子機構を解析し、腹膜細胞の分泌するフィブロネクチンが卵巣癌のマトリックスメタロプ口テアーゼ9(MMP-9)の分泌と癌細胞の浸潤を活性化することを見出した。このMMP-9分泌活性化において、focal adhesion kinase(FAK)とRasシグナル伝達系が決定的に重要であることを明らかにした。(浜口) 3.神経変性疾患、悪性腫瘍のモデル動物の作製と利用 (1) ミッドカイン(MK)遺伝子ノックアウトマウスを作製した。このマウスは生後1ヶ月の時点で海馬の発育が遅れること、行動異常が生じることを明らかにした。(村松) (2) GD3合成酵素遺伝子とGM1/GD1b/GA1合成酵素遺伝子のノックアウトマウスをそれぞれ樹立に成功し、神経系を中心とした病理変化と行動異常について観察している。(古川) (3) RET癌遺伝子導入トランスジェニックマウスにおいて良性の色素細胞腫瘍から悪性黒色腫へ進展する系の確立に成功した。この悪性転化に伴って、MAPキナーゼ、MMP-9の活性の亢進、TIMP-2の活性低下が見られることを明らかにした。(高橋)

Research Products

(24 results)

All Other

All Publications (24 results)

[Publications] Toshihide Iwashita et al.: "Biological and biochemical propertied of Ret with kinase domain mutations identified in multiple endocrine neoplasia type 2B and familial medullary thyroid carcinoma." Oncogene. in press.
[Publications] Hideki Murakami et al.: "Rho-dependent and-independent tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase,paxillin and p130Cas mediated by Ret kinase." Oncogene. in press.
[Publications] Masahide Takahashi et al.: "Co-degregation of MEN2A and Hirschsprung's disease:the same mutaton of RET with botth gain and loss-of-function?" Hum.Mutation. in press.
[Publications] Nobuaki Maeda et al.: "A receptor-like protein tyrosine phosphatase z (PTPz/RPTPb) binds midkine:Involvement of arginine 78 of midkine in the high affinity binding to PTPz." J.Biol.Chem.in press.
[Publications] Eishin Nakamura et al.: "Disruption of the midkine gene(Mdk)resulted in alered expression of a calcium-inducing protein in the hippocampus of infant mice and their abnormal behaviour." Genes to Cells. in press.
[Publications] Qi-Wen Fan et al.: "Spatially and temporally regulated expression of N-acetylglucosmine-6-O-sulfotransferase during mouse embryogensis." Glycobiology. in press.
[Publications] Tetsuya Okajima et al.: "Molecular cloning of a novel alph2,3-sialyltransferase (ST3Gal VI) that sialylates type II lactosamine structures on glycoproteins and glycolipids." J.Biol.Chem.in press.
[Publications] Satoshi Fukumoto et al.: "Expression cloning of mouse cDNA of CMP-NeuAc:lactosylceramide alpha2,3-sialyitransferase(GM3 synthase),an enzyme that initiates the synthesis of gangliosides." J.Biol.Chem.in press.
[Publications] Masashi Kato et al.: "Transgenic mouse model for skin malignant melanoma." Oncogene. 17. 1885-1888 (1998)
[Publications] Masahide Takhashi et al.: "Mechanisms of development of multiple endocrine neoplasia type 2 and Hirschsprung's disease by ret mutations." Recent Results Cancer Res.154. 229-236 (1998)
[Publications] Chika Nozaki et al.: "Calcium-dependent Ret activation by GDNF neurturin." Oncogene. 16. 293-299 (1998)
[Publications] Kenji Uchimura et a.: "Molecular cloning and characterization of an N-acetylglucosmine 6-O-sulfotransferase." J.Biol.Chem.273. 22577-22583 (1998)
[Publications] Tadahiko Igakura et al.: "Basigin,a member of the immunoglobulin superfamily plays important roles in perimplantation embryogenesis and spermatogenesis." Dev.Biol.194. 152-165 (1998)
[Publications] Kenji Uchimura et al.: "Mouse chaondroitin 6-sulfotransferase: Molecular cloning,characterization and chromosomal mapping." Glycobiology. 5. 489-496 (1998)
[Publications] Masahiko Yamamoto et al.: "Clustering of CMT1A duplication breakpoints in a 700 bp interval of the CMT1A-REP repeat/" Hum.Mutation. 11. 109-113 (1998)
[Publications] Takayuki Itoh et al.: "Nerve growth factor maintains regulation of intracellular calucium in neonatal sympathetic neurons but not in mature or aged neurons." Neuroscience. 82. 641-651 (1998)
[Publications] Mei Li et al.: "Nuclear inclusions of the androgen receptor protein in spinal and bulbar muscular atrophy." Ann.Neurol.44. 249-254 (1998)
[Publications] Mei.Li et al.: "Nunneural muclear inclusions of androgen receptor protein in spinal and bulbar muscular atrophy." Am.J.Pathol.153. 695-701 (1998)
[Publications] Kogo Takamiya et al.: "Complex gangliosides are essential spermatogenesis of mice: Possible roles in the transport of testosterone." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 77. 466-471 (1998)
[Publications] Kiyosumi Shibata et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin in the ovarian cancer cells" Cancer Res.58. 900-903 (1998)
[Publications] Kiyosumi Shibata et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin in the ovarian cancer cells" Cancer Res.58. 900-903 (1998)Kenji Naruse et al.:
[Publications] "Strech dependent tyrosine phosphorylation regulates morphological response of endothelial cells." Oncogene. 17. 455-463 (1998)
[Publications] Masayuki Kuno et al.: "Hematopoietic transription factor GATA-2 activates transcripition" AIDS. 12. (1998)
[Publications] Masayuki Kuno et al.: "Hematopoietic transription factor GATA-2 activates transcripition" AIDS. 12. (1998)903-909

1998 Fiscal Year Annual Research Report

神経変性疾患と悪性腫瘍の分子医学

Principal Investigator

高橋 雅英 名古屋大学, 医学部, 教授 (40183446)

Research Products

[Publications] Toshihide Iwashita et al.: "Biological and biochemical propertied of Ret with kinase domain mutations identified in multiple endocrine neoplasia type 2B and familial medullary thyroid carcinoma." Oncogene. in press.

[Publications] Hideki Murakami et al.: "Rho-dependent and-independent tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase,paxillin and p130Cas mediated by Ret kinase." Oncogene. in press.

[Publications] Masahide Takahashi et al.: "Co-degregation of MEN2A and Hirschsprung's disease:the same mutaton of RET with botth gain and loss-of-function?" Hum.Mutation. in press.

[Publications] Nobuaki Maeda et al.: "A receptor-like protein tyrosine phosphatase z (PTPz/RPTPb) binds midkine:Involvement of arginine 78 of midkine in the high affinity binding to PTPz." J.Biol.Chem.in press.

[Publications] Eishin Nakamura et al.: "Disruption of the midkine gene(Mdk)resulted in alered expression of a calcium-inducing protein in the hippocampus of infant mice and their abnormal behaviour." Genes to Cells. in press.

[Publications] Qi-Wen Fan et al.: "Spatially and temporally regulated expression of N-acetylglucosmine-6-O-sulfotransferase during mouse embryogensis." Glycobiology. in press.

[Publications] Tetsuya Okajima et al.: "Molecular cloning of a novel alph2,3-sialyltransferase (ST3Gal VI) that sialylates type II lactosamine structures on glycoproteins and glycolipids." J.Biol.Chem.in press.

[Publications] Satoshi Fukumoto et al.: "Expression cloning of mouse cDNA of CMP-NeuAc:lactosylceramide alpha2,3-sialyitransferase(GM3 synthase),an enzyme that initiates the synthesis of gangliosides." J.Biol.Chem.in press.

[Publications] Masashi Kato et al.: "Transgenic mouse model for skin malignant melanoma." Oncogene. 17. 1885-1888 (1998)

[Publications] Masahide Takhashi et al.: "Mechanisms of development of multiple endocrine neoplasia type 2 and Hirschsprung's disease by ret mutations." Recent Results Cancer Res.154. 229-236 (1998)

[Publications] Chika Nozaki et al.: "Calcium-dependent Ret activation by GDNF neurturin." Oncogene. 16. 293-299 (1998)

[Publications] Kenji Uchimura et a.: "Molecular cloning and characterization of an N-acetylglucosmine 6-O-sulfotransferase." J.Biol.Chem.273. 22577-22583 (1998)

[Publications] Tadahiko Igakura et al.: "Basigin,a member of the immunoglobulin superfamily plays important roles in perimplantation embryogenesis and spermatogenesis." Dev.Biol.194. 152-165 (1998)

[Publications] Kenji Uchimura et al.: "Mouse chaondroitin 6-sulfotransferase: Molecular cloning,characterization and chromosomal mapping." Glycobiology. 5. 489-496 (1998)

[Publications] Masahiko Yamamoto et al.: "Clustering of CMT1A duplication breakpoints in a 700 bp interval of the CMT1A-REP repeat/" Hum.Mutation. 11. 109-113 (1998)

[Publications] Takayuki Itoh et al.: "Nerve growth factor maintains regulation of intracellular calucium in neonatal sympathetic neurons but not in mature or aged neurons." Neuroscience. 82. 641-651 (1998)

[Publications] Mei Li et al.: "Nuclear inclusions of the androgen receptor protein in spinal and bulbar muscular atrophy." Ann.Neurol.44. 249-254 (1998)

[Publications] Mei.Li et al.: "Nunneural muclear inclusions of androgen receptor protein in spinal and bulbar muscular atrophy." Am.J.Pathol.153. 695-701 (1998)

[Publications] Kogo Takamiya et al.: "Complex gangliosides are essential spermatogenesis of mice: Possible roles in the transport of testosterone." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 77. 466-471 (1998)

[Publications] Kiyosumi Shibata et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin in the ovarian cancer cells" Cancer Res.58. 900-903 (1998)

[Publications] Kiyosumi Shibata et al.: "Both focal adhesion kinase and c-Ras are required for the enhanced Matrix Metalloproteinase-9(MMP-9)secretion by fibronectin in the ovarian cancer cells" Cancer Res.58. 900-903 (1998)Kenji Naruse et al.:

[Publications] "Strech dependent tyrosine phosphorylation regulates morphological response of endothelial cells." Oncogene. 17. 455-463 (1998)

[Publications] Masayuki Kuno et al.: "Hematopoietic transription factor GATA-2 activates transcripition" AIDS. 12. (1998)

[Publications] Masayuki Kuno et al.: "Hematopoietic transription factor GATA-2 activates transcripition" AIDS. 12. (1998)903-909

高橋雅英名古屋大学, 医学部, 教授 (40183446)