白血病関連転写因子AML1(PEBP2αB)による造血細胞の分子制御機構

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11138251
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 奥田 司 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (30291587)
• Keywords: AML1 / PEBP2 / 白血病 / 造血幹細胞 / 転写因子 / ES細胞 / 遺伝子ターゲティング / がん遺伝子

Research Abstract

AML1は、ヒト白血病における染色体転座の最も高頻度の標的遺伝子であり、造血発生制御に関与する転写調節因子をコードする。当該研究では、AML1欠損マウス胚性幹細胞(ES細胞)の造血分化障害を、野性型AML1b(PEBP2αB1)遺伝子のノックイン発現によってレスキューする実験系を構築し、この実験システムを用いてAML1の生物作用メカニズムの解析をすすめている。本年度は、まず、このノックインクローンを用いてキメラマウスを作成し、その造血組織でのクローン解析を行って、この造血レスキューが個体のレべルにおよんでいることを見い出した。ここでは、AML1bの発現によってES細胞がリンパ系への分化能力も再獲得することが明らかにされた。同時にこのことは、この実験システムによって得られる結果がinvivoでのAML1機能を反映していることを示しているものと思われる。次に、野性型AML1bのかわりにC末端の欠失変異体をノックインさせることによってその生物作用を検討した。その結果、C末端のVWRPYモチーフを持たないAML1bΔ466変異体や、このモチーフを含めたC末端の61アミノ残基を欠くAML1bΔ390変異体でもその生物活性は保たれていることが判明した。一方、転写活性化ドメインを欠く変異体であるAML1b△320やAML1bΔ293ではこの造血レスキュー作用は観察されなかった。これらの結果から、AML1による造血発生制御作用はその転写活性化機能と相関していること、そして、転写抑制作用を持つと考えられているC末端側のサブドメインはこの造血制御作用の発現にとって必須ではなく、他の生物作用に関与している可能性があるものと考えられた。

Research Products

• [Publications] Okuda, T.: "Biological characteristics of the leukemia-associated transcriptional factor AML1 disclosed by hematopoietic rescue of AML1-deficient embryonic stem cells by using a knock-in strategy"Molecular and Cellular Biology. 20・1. 319-328 (2000)
• [Publications] 奥田司: "AML1と白血病"血液腫瘍科. 40・1. 1-12 (2000)
• [Publications] 奥田司: "AML1遺伝子操作マウス"医学のあゆみ. 190・5. 323-329 (1999)
• [Publications] 奥田司: "造血初期発生制御における転写因子AML1の役割"実験医学. 17・9. 1136-1143 (1999)
• [Publications] 奥田司: "AML1遺伝子の生物学的意義"現代医療. 31・5. 1125-1134 (1999)
• [Publications] Okuda, T.: "Role of AML1 in normal and leukemic hematopoieses. In "Moleculau Target for Hematological Malignancies and Cancer" (Ed. by Niho Y.)"Kyushu University Press (Fukuoka, Japan) (in press). (2000)