1999 Fiscal Year Annual Research Report

転写因子の欠損に直接起因する発がんにおける基本転写因子TFIIEとTFIIHの役割

Research Project

Project/Area Number	11139242
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	大熊芳明大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (70192515)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	花岡文雄大阪大学, 細胞生体工学センター, 教授 (50012670) 前川隆文大阪大学, 細胞生体工学センター, 助手 (90273721)
Keywords	転写 / TFIIH / PolII / CTD / リン酸化 / 色素性乾皮症 / DNA傷害 / TFIIE
Research Abstract	1.TFIIHのキナーゼ活性の基質特異性と転写におけるPolIIの特異的リン酸化の解析 PolII最大サブユニットのC末の7アミノ酸の繰り返し構造(CTD)のセリン残基リン酸化は転写の伸長過程に大きく関わり、その異常で発がんに至る疾患が複数見出されている。このCTDリン酸化を転写開始の際に行うTFIIHの基質特異性とPolIIの転写との関連を追及した。ヒトTFIIHを用いてCTDリン酸化部位を決定したところ、CTD配列の2番目と5番目のセリン残基をリン酸化した。特に5番目のセリンのリン酸化は転写開始複合体の中でTFIIEにより特異的に誘導され、転写伸長への移行との関連性が考えられる。 2.TFIIHの欠損に起因する発がん患者細胞からの欠損TFIIHの活性の解析 TFIIHは、紫外線等によるDNA傷害の修復にも関与し、2個のサブユニットXPBとXPDの一方の変異で発がんを伴う色素性乾皮症が発症する。我々は、TFIIHのXPBかXPDに変異を有する患者の欠損TFIIHと正常なTFIIHの機能を比較した。すると、XPB変異TFIIHは転写活性に大きな低下が見られるが、PolIIリン酸化活性の低下は小さいこと、一方XPD変異TFIIHには、転写活性の低下とPolIIリン酸化活性の低下の両方が見られた。 3.TFIIHのDNA修復反応における他の修復因子との協調的制御機能の解析我々は、これまでTFIIHが遺伝子DNA上の紫外線、薬剤等による傷害部位にDNA修復因子が集まり修復する際に、形成される複合体内で損傷を認識するXPCと損傷DNA部位の3'側を切断するXPGの2者に結合することを見出している。今回、これら因子がTFIIHと相互作用し、その際紫外線、薬剤により損傷を生じたDNAとの相互作用の効率は、損傷の無いものより高いことを明らかにした。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Okuda, M. et al.: "Structure of the central core domain of TFIIEβ with a novel double-stranded DNA-binding surface"EMBO J.. 19. (2000)
[Publications] Watanabe, Y. et al.: "Modulation of TFIIH-associated kinase activity by complex formation and its relationship with CTD phosphory lation of RNA polymerase II"Genes Cells. 5. (2000)
[Publications] Yokoi, M. et al.: "The xeroderma pigmentosum group C protein complex XPC-HR23B plays an important vole in the recruitment of TFIIH to damaged DNA"J. Biol. Chem.. 275. (2000)
[Publications] Araki, M. et al.: "Reconstitution of damage DNA excision reaction on SV40 mini-chromosomes with purified nucleotide excision repair"Mutation Res.. 436. (2000)
[Publications] 大熊芳明: "真核生物における基本転写因子とRNAポリメラーゼIIの機能と構造生物学"蛋白質・核酸・酵素. 44. 438-456 (1999)
[Publications] 横井雅幸他: "皮膚癌と基本転写因子"現代医療. 32. 473-480 (2000)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

転写因子の欠損に直接起因する発がんにおける基本転写因子TFIIEとTFIIHの役割

Principal Investigator

大熊 芳明 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (70192515)

Research Products

[Publications] Okuda, M. et al.: "Structure of the central core domain of TFIIEβ with a novel double-stranded DNA-binding surface"EMBO J.. 19. (2000)

[Publications] Watanabe, Y. et al.: "Modulation of TFIIH-associated kinase activity by complex formation and its relationship with CTD phosphory lation of RNA polymerase II"Genes Cells. 5. (2000)

[Publications] Yokoi, M. et al.: "The xeroderma pigmentosum group C protein complex XPC-HR23B plays an important vole in the recruitment of TFIIH to damaged DNA"J. Biol. Chem.. 275. (2000)

[Publications] Araki, M. et al.: "Reconstitution of damage DNA excision reaction on SV40 mini-chromosomes with purified nucleotide excision repair"Mutation Res.. 436. (2000)

[Publications] 大熊芳明: "真核生物における基本転写因子とRNAポリメラーゼIIの機能と構造生物学"蛋白質・核酸・酵素. 44. 438-456 (1999)

[Publications] 横井雅幸 他: "皮膚癌と基本転写因子"現代医療. 32. 473-480 (2000)

大熊芳明大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (70192515)

[Publications] 横井雅幸他: "皮膚癌と基本転写因子"現代医療. 32. 473-480 (2000)