悪性脳腫瘍普遍発現遺伝子の同定とそのプロモーターを組込んだ遺伝子治療の開発的研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11140241
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 清水 惠司 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50162699)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 池中 一裕 岡崎国立共同研究機構, 生理学研究所, 教授 (00144527) ; 森内 秀祐 大阪大学, 医学系研究科, 助手
• Keywords: Glioma / MAFE gene family / SAGE / Retrovirus / Promoter / Gene therapy

Research Abstract

グリオーマ細胞において、MBPやGFAP遺伝子の発現に差があることから、グリオーマ全般に広く適応する遺伝子治療を確立するには、グリオーマ細胞に最も普遍的に発現している遺伝子ををクローニングし、そのプロモーター領域を同定することが肝要である。本研究では、このグリオーマ普遍発現遺伝子およびそのプロモーター領域をSAGE法(Serial Analysis of Gene Expression)を用いて同定し、新たなベクター構築することでグリオーマ全般に対する遺伝子治療法を開発することを目的としていた。しかし、1999年中頃には、Cancer Genome Anatomy Project(CGAP)の一環として米国で積極的に行われていた原発性グリオーマに対するSAGE法分析の結果がインターネット上に公開された。この公開されたデータと、私共が独自に実証してきたデータの中で共通して高い発現量を示していたsec61 gamma遺伝子に対するプロモーターの同定を3ヶ月行うも十分な結果が得られなかった。一方、この一連の実験の中で、MAGE family遺伝子に40-50%の相同性を示す未知の遺伝子(GS-1)を同定することができた。このGS-1遺伝子の分子量は882bpと473bpであり、グリオーマ組織のみならず、正常脳と卵巣に特異的に発現していることが実証された。今後、このGS-1遺伝子の全長をクローニングし、その機能を検討すると共に、この遺伝子のプロモーター領域を同定していく予定である。そして、同定されたプロモーターで制御されたlacZ遺伝子組み込みレトロウイルスベクターを構築して、各種ヒトグリオーマ細胞株中におけるベクター活性を他のベクターと比較検討すると共に、このプロモーターで制御したHSV tk遺伝子組み込みレトロウイルスベクターを構築し、悪性グリオーマに対する遺伝子治療をin vitroおよびin vivoモデルを用いて実施する予定である。

Research Products

• [Publications] Kishima H: "Monoclonal antibody ONS-M21 recognizes integrin α3 in gliomas and medulloblastomas"Br J Cancer. 79. 333-339 (1999)
• [Publications] Tamura K: "Eradication of murine brain tumors by direct inoculation of concentrated high titer-recombinant retrovirus harboring herpes simplex virus thymidine kinase gene"Hum Gene Ther. (in press).
• [Publications] Nanmoku K: "Highly efficient gene transfer into the nervous system using high-titer retroviral vector in vitro and in vivo"Hum Gene Ther. (in press).