WntシグナルによるArmadillo/βカテニン蛋白の分解制御機構の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11144219
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 柳川 伸一 京都大学, ウイルス研究所, 助手 (70183978)
• Keywords: Wnt / シグナル伝達 / Armadillo / β-カテニン / プロテアソーム

Research Abstract

Wnt/Wingless(Wg)シグナル伝達経路の主要な構成員は、Scaffold蛋白であるAxinに結合して大きな複合体を形成し、β-カテニン/Am(Arm)蛋白質の分解制御装置として機能している。マウスとDrosophilaのAxinのアミノ酸配列を比較すると、癌抑制遺伝子産物APCを結合するRGSドメインとC-末端のDIXドメイン以外には、非常に高い相同性は認められない。そこで様々のDaxinの欠損変異体を、Wgに感受性を持つDrosophila培養細胞S2R+に導入し、そのWgシグナル伝達に対する効果を検討した。細胞内Armレベルへの影響、シグナル伝達経路の主要な構成員との結合性、並びにTcf依存性転写活性化を指標として各変異体の機能を解析した結果、1)Arm及びZw3と分子中央部で、またC-末端部でDishevclled(Dsh)及びProtein phosphatase 2Aと結合する事、2)Wgシグナル伝達の阻害には、N-末端からArm結合部位で十分であり、またC-末端部だけからなる変異体はDominant-negativeとなりArm蓄積を誘導する事、3)細胞内でのDshとDaxinのco-localizationが認められる事、4)Wg刺激によりDaxinは低リン酸化型となる事、5)DaxinはWg,Dsh,全長ArmによるTcf依存性転写活性化を阻害出来るが、N-末端にあるリン酸化標的配列を欠いたArmによる転写活性化は阻害出来ない事が明らかとなった。6)またキナーゼ活性を欠くZw3もDaxinと結合する事から、このZw3変異体が持つ強いArm誘導活性の分子機構が明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Jong-Seo Lee: "Characterization of Mouse Dishevelled (DV1) Proteins in Wnt/Wingless Signaling Pathway"The Journal of Biological Chemistry. 274・30. 21464-21470 (1999)
• [Publications] Jong-Seo Lee: "Intracisternal Type A particle-Mediated Activation of the Notch4/int3 Gene in a Mouse mammary Tumor : Generation of Truncated Notch4/int3 mRNAs by Retroviral Splicing Events"Journal of Virology. 73・6. 5166-5171 (1999)
• [Publications] Jong-Seo Lee: "Murine leukemia provirus-mediated activation of the Notch1 gene leads to induction of HES-1 in a mouse T lymphoma cell line, DL-3"FEBS Letters. 455. 276-280 (1999)
• [Publications] 柳川伸一: "Wnt・ Fri33led"Bio Science用語ライブラリー「細胞内シグナル伝達」改訂2版羊土社. 32-33 (1999)