サルにおけるSDF-1発現系の作製と新たなCXCR4アンタゴニストの探索

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11161214
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 田代 啓 京都大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (10263097)
• Keywords: AIDS / HIV / SDF-1 / CXCR4 / アンタゴニスト / サル / SHIV / 低分子量化合物

Research Abstract

今年度は、新規低分子量SDF-1受容体アンタゴニスト候補分子10種類について、抗HIV活性を持つかどうかを、in vitro HIV/SHIV感染系で検討し、分子量約900のONO-4007が抗HIV/SHIV活性を持つことを同定した。抗HIV活性の背後にある分子メカニズムとして、低分子量化合物ONO-4007によるマウスT細胞株EL-4のin vitro CXCR4 down modulationを、human SDF-1-Igキメラタンパク質を用いるFACS解析で検討し、down modulationをみとめた。in vitro感染実験系での抗HIV/SHIV活性を調べるため、X4株であるNL432、IIIBや、R5X4株である89.6Pを、低分子量化合物ONO-4007またはコントロールのSDF-1タンパク質存在下、非存在下にヒトT細胞株(MT4,M8166,H9)に感染させ、経時的に培養液中逆転写酵素活性を測定し、低分子量化合物ONO-4007に用量依存的に抗HIV/SHIV活性をみとめた。今後、京大ウイルス研究所・速水博士らと共同で、大動物サルを用いて、低分子量化合物ONO-4007の抗SHIV活性がin vitroで発揮されるかどうかを検討するため予備的に、低分子量化合物ONO-4007のin vitroにおけるサルの抹消血球細胞における抗HIV/SHIV活性を検討し、用量依存的な抗HIV/SHIV活性をみとめた。また、アデノウイルスベクターを用いたサルにおけるSDF-1過剰産生系を作製した。

Research Products

• [Publications] Revy, P. et. al.: "A Syndrome Involving Intrauterine Growth Retardation, Microcephaly, Cerebellar Hypoplasia, B Lymphocyte Deficiency, and Progressive Pancytopenia"Pediatrics. 105. 22476-22483 (2000)
• [Publications] Shioda, T. et. al.: "Anti-HIV-1 and chemotactic activities of human stromal cell-derived factor 1α (SDF-1α) and SDF-1β are abolished by CD26/dipeptidyl peptidase IV-mediated cleavage"Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.. 95. 6331-6336 (1998)
• [Publications] Moriya, C. et. al.: "Large quantity production with extreme convenience of human SDF-1α and SDF-1β by a Sendai virus vector"FEBS Lett.. 425. 105-111 (1998)
• [Publications] Winkler, C. et. al.: "Genetic Restriction of AIDS Pathogenesis by an SDF-1 Chemokine Gene Variant"Science. 279. 389-393 (1998)