2000 Fiscal Year Annual Research Report

mRNAの核外輸送機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	11237206
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	谷時雄九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (80197516)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大島靖美九州大学, 大学院・理学研究院, 教授 (90037606)
Keywords	mRNA / 輸送 / 分裂酵母 / 温度感受性変異株 / 核 / マイクロインジェクション / 遺伝子 / ATP結合蛋白質
Research Abstract	昨年度までに、分裂酵母のmRNA核外輸送に関与するptr7^+遺伝子が配列内にATP/GTP結合モチーフをもつ新規蛋白質をコードしていることを明らかにした。そこで、Ptr7pの機能を探るため、大腸菌で発現させたPtr7pを用いてATPやGTPに対する結合活性をUVクロスリンク法によって調べた。その結果、Ptr7pはATPとADPに対して強い結合活性を持つことが示された。GTPに対しても弱い結合が見られたがGDPにはほとんど結合しなかった。また、Ptr7pとRasGAPが相互作用することをyeast two hybrid systemで明らかにした。Ptr7pはATP結合型からADP結合型への構造変化を行うことにより、輸送複合体の形成や解離などの分子スイッチとして機能している可能性が考えられた。また、新たに分裂酵母のts変異株バンクをスクリーニングし、新規なmRNA核外輸送変異株ptr9を同定した。更に、蛍光標識したヒトβグロビンmRNAを培養細胞(HeLa細胞)核にマイクロインジェクションし、mRNAが核から細胞質へと輸送される過程を生きた細胞中で経時的に可視化解析可能な新規実験系を確立し、その実験系を用いてmRNAの5′末端に存在するキャップ構造や3′末端ポリA配列が核外輸送を促進するシグナルとして機能していること、及び遺伝子の転写を阻害するとmRNAの核外輸送も同時に阻害されることを明らかにした。今回の結果から、遺伝子の転写機構とmRNAの核外輸送機構との間に密接な連携機構があるという興味深い可能性が示唆された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yasuaki Habara: "Mutation in the prp12^+ gene encoding a homologue of SAP130/SF3b130 causes differential inhibition of pre-mRNA splicing and arrest of cell-cycle progression in Schizosaccharomyces pombe"RNA. (in press). (2001)
[Publications] Kazuo Tatebayashi: "Fission yeast Toi1p, which interacts with the small GTPase Ran, is required for mitosis-to-interphase transition and poly (A)^+ RNA metabolism"Genetics. (in press). (2001)
[Publications] Wiebke Schmidt: "Fission yeast Prp4p kinase regulates pre-mRNA splicing by phosphorylating a non-SR-splicing factor"EMBO Reports. (in press). (2001)
[Publications] Takeo Shoubuike: "The dhp1^+ gene encoding a putative nuclear 5'-3' exoribonuclease is required for proper chromosome segregation in fission yeast"Nucleic Acids Research. (in press). (2001)
[Publications] Mitchell Beales: "Mutations in the large subunit of U2AF disrupt pre-mRNA splicing, cell cycle progression and nuclear structure"Yeast. 16. 1001-1013 (2001)
[Publications] 谷時雄: "snRNAとスプライシング"シュプリンガー・フェアラーク東京、RNA研究の最前線. 101-117 (2001)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

mRNAの核外輸送機構に関する研究

Principal Investigator

谷 時雄 九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (80197516)

Research Products

[Publications] Yasuaki Habara: "Mutation in the prp12^+ gene encoding a homologue of SAP130/SF3b130 causes differential inhibition of pre-mRNA splicing and arrest of cell-cycle progression in Schizosaccharomyces pombe"RNA. (in press). (2001)

[Publications] Kazuo Tatebayashi: "Fission yeast Toi1p, which interacts with the small GTPase Ran, is required for mitosis-to-interphase transition and poly (A)^+ RNA metabolism"Genetics. (in press). (2001)

[Publications] Wiebke Schmidt: "Fission yeast Prp4p kinase regulates pre-mRNA splicing by phosphorylating a non-SR-splicing factor"EMBO Reports. (in press). (2001)

[Publications] Takeo Shoubuike: "The dhp1^+ gene encoding a putative nuclear 5'-3' exoribonuclease is required for proper chromosome segregation in fission yeast"Nucleic Acids Research. (in press). (2001)

[Publications] Mitchell Beales: "Mutations in the large subunit of U2AF disrupt pre-mRNA splicing, cell cycle progression and nuclear structure"Yeast. 16. 1001-1013 (2001)

[Publications] 谷時雄: "snRNAとスプライシング"シュプリンガー・フェアラーク東京、RNA研究の最前線. 101-117 (2001)

谷時雄九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (80197516)