形態形成過程におけるMT1-MMPの機能発現制御機構の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11240203
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 佐藤 博 金沢大学, がん研究所, 教授 (00115239)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 原田 志津子 金沢大学, がん研究所, 助手 (10218646)
• Keywords: 形態形成 / MT1-MMP / 細胞外マトリックス / 発現制御 / コラーゲン / MMP-2 / ゼラチン / 腎臓

Research Abstract

形態形成にともなう細胞外マトリックスの再構築にはマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)と呼ばれる一群の金属酵素が重要な役割は果たすとされているがその実体については不明の点が多い。これまでに同定された約20種類のMMPの内でもMT1-MMP,MMP-2,MMP-9はその発現頻度、基質特異性などから特に重要と予想された。そこで本研究ではこれらのMMPの特に組織再構築過程における活性発現制御に関わる因子を明らかにすることを目的としてヒト胎児腎およびラット肝伊東細胞のcDNAライブラリーを用いて遺伝子発現クローニングを行った。その結果、MT1-MMPの活性を阻害する因子としてTestican-3のスプライシング変異体(N-Tes)がヒト胎児腎ライブラリーから得られた。N-TesはMT1-MMPの活性発現を負にコントロールすることにより腎臓の形態形成に関与することが示唆された。また、ラット肝伊東細胞のcDNAライブラリーからはMMP-9のスプライシング変異体遺伝子(N-MMP-9)がクローニングされたがその遺伝子産物は細胞内では分子量が110kDa、細胞外へは70kDaの酵素として産生される。N-MMP-9の酵素活性などについては現在検討中であるが、N-MMP-9 mRNAはラット組織では本来のMMP-9に近いレベルで発現していることがRT-PCRにより確認されている。ラット以外の種についてもその発現の有無を検討している。

Research Products

• [Publications] H. Nakamura, et al.: "Enhanced production and activation of progelatinase A mediated by membrane-type 1 matrix metalloproteinase in human papillary thyroid carcinomas"Cancer Research. 59. 467-473 (1999)
• [Publications] H. Noritake, et al.: "Overexpression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1(TIMP-1) in metastatic MDCK cells transformed by v-src"Clinical an Experimental Metastasis. 17. 105-110 (1999)
• [Publications] H. Takeshita, et al.: "Matrix metalloproteinase 9 is induced by Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 C-terminal activation regions 1 and 2"Journal of Virology. 73. 5548-5555 (1999)
• [Publications] Y. Kitagawa, et al.: "Expression of messenger RNAs for membrane-type 1, 2, and 3 matrix metalloproeinases in human renal cell carcinomas"Journal of Urology. 162. 905-909 (1999)
• [Publications] H. Miyamori, et al.: "Human membrane type-2 matrix metalloproteinase is defective in cell-associated activation of progelatinase A"Biochem. Biophys. Res. Comm.. (印刷中).
• [Publications] K-R. Kim, et al.: "Transformation of Madin-Darby canine kidney (MDCK) epithelial cells by Epstein-Barr virus latent membrane protein 1(LMP1) induces expression of Ets1 and invasive growth"Oncogene. (印刷中).
• [Publications] 佐藤博: "タンパク質分解-分子機構と細胞機能"シュプリンガー・フェアラーク東京(印刷中).
• [Publications] 佐藤博: "MMPと疾患-基礎と臨床"現代医療社(印刷中).
• [Publications] 佐藤博: "肝転移"医学書院. 3-13 (2000)