2000 Fiscal Year Annual Research Report
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11240206
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
岡田 保典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00115221)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
池田 栄二 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (30232177)
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| Keywords | MMP / ADAM / 細胞外マトリックス / 分解 / 浸潤・転移 / プロテオグリカン |
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| Research Abstract |
マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)とADAMTS4(aggrecanase-1)による脳プロテオグリカン(ブレビカン)の分解について検討するとともに、tissue inhibitors of metallo-proteinases(TIMP-1,2,3,4)のADAMTS4に対する阻害活性を調べた。また、vascular endothelial growth factor(VEGF)のマトリクラインについて解析した。得られた研究成果は、以下の通りである。
(1).MMP-1,2,3,7,8,9,10,13,MT1-MMP,MT3-MMPおよびADAMTS4をブレビカンに作用させたところ、MMP-1,2,3,7,8,10,13,ADAMTS4が分解活性を示した。N末端アミノ酸シークエンスから、これらのMMPはAla^<360>-Phe^<361>ボンドを共通して切断するのに対し、ADAMTS4はGlu^<395>-Ser^<396>ボンドで分解し、ブレビカンのMMP切断部位とADAMTS切断部位の存在が明らかとなった。
(2).ADAMIS4の軟骨プロテオグリカン(アグリカン)分解活性に対するTIMP-3の阻害活性は最も強く、そのIC_<50>値は7.9nMであり、他のTIMPより少なくとも44倍以上インヒビター活性が強かった。
(3).VEGF_<165>をbaitとして酵母のtwo hybrid systemを用いて軟骨細胞cDNAライブラリーをスクリーニングし、シークエンス可能な120個のクローンが得られた。これらには、フィブロネクチン、コラーゲン、テネシンなどの細胞外マトリックス分子の他、膜タンパクや種々のサイトカインなどが含まれていた。これらの分子とVEGF_<165>との結合能と結合による血管新生抑制活性を検討中である。
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[Publications] Nakamura H. et al.: "Brevican is degraded by matrix metalloproteinases (MMPs) and aggrecanase-1 (ADAMTS4) at the different sites."J.Biol.Chem. 275. 38885-38890 (2000)
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[Publications] Ikeda M. et al: "Expression of vascular endothelial growth factor isoforms and their teceptors Flt-1, KDR and neuropilin-1 in synovial tissues of rheumatoid arthritis."J Pathol. 191. 426-433 (2000)
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[Publications] Yamanaka H. et al: "Expression and tissue localization of membrane-types 1, 2 and 3 matrix : metalloproteinases in rheumatoid arthritis."Lab.Invest.. 80. 677-687 (2000)
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[Publications] Ishida S. et al: "Co-expression of VEGF receptors VEGF-R2 and neuropilin-1 in proliferative diabetic retinopathy."Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.. 41. 1649-1656 (2000)
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[Publications] Takizawa M. et al: "Production of tissue inhibitor of metalloproteinases-3 is selectively enhanced by calcium pentosan polysulfate in human rheumatoid synovial fibroblasts."Arthritis Rheum. 43. 812-820 (2000)
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[Publications] Nabeshima K.: "Front-cell-specific expression of membrane-type 1 matrix metalloproteinase and gelatinase A during cohort migration of colon carcinoma cells induced by hepatocyte growth factor/scatter factor"Cancer Res.. 60. 3364-3369 (2000)
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[Publications] Okada Y: "Kelley's Textbook of Rheumatology,"W.B.Saunders Company.. 55-72 (2001)
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[Publications] Okada Y.: "Methods in Molecular Biology"Human Press Inc.. 359-365 (2001)
