2000 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
11450314
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Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
Principal Investigator |
跡見 晴幸 京都大学, 工学研究科, 助教授 (90243047)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福居 俊昭 京都大学, 工学研究科, 助手 (80271542)
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Keywords | 炭酸固定 / Rubisco / ATP-citrate lyase / ビオチン / カルボキシラーゼ |
Research Abstract |
油田土壌由来の通性嫌気性細菌HD-1株に複数のbiotin化タンパク質が存在することを明らかにした。そのうちの2種は原核細胞では例のない100kDaを越える巨大biotin化タンパク質であった。120kDaのbiotin化タンパク質の遺伝子を単離し、その構造を明らかにしたところ、biotin carboxylase、biotin carboxyl carrier protein及びcarboxyltransferaseに対応する3つのdomainから構成されていることが判明した。組換え型の120 kDa biotin化タンパク質はacetyl-CoA carboxylaseおよびpropionyl-CoA carboxylase活性を有し、既存のacetyl-CoA/propionyl-CoA carboxylaseとは異なる新規な構造を有する酵素であることが明らかとなった。超好熱始原菌Thermococcus kodakaraensis KOD1株のゲノム上に存在するRubisco様遺伝子が、実際に高い炭酸固定能を有する酵素をコードしていることを明らかにした。本遺伝子が転写翻訳され、Rubiscoがタンパク質として存在していることも明らかにした。本酵素がlarge subunitのみから構成されること、および新規な10量体、五角形構造を有することを明らかにした。原核生物では初めてATP-citrate lyase遺伝子を単離し、本酵素の構造を明らかにした。既存のATP-citrate lyaseと異なり、原核生物のATP-citrate lyaseが2つのpolypeptideからなるhetero-enzymeであること、活性には両subunitが必須であることを明らかにした。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Haruyuki Atomi: "Presence of a structurally novel type Rubisco in the hyperthermophilic archaeon, Pyrococcus kodakaraensis KOD1."Journal of Biological Chemistry. 274(8). 5078-5082 (1999)
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[Publications] Haruyuki Atomi: "Rubisco from the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus kodakaraensis KOD1 is composed solely of large subunits and forms a pentagonal structure."Journal of Molecular Biology. 293(1). 57-66 (1999)
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[Publications] Haruyuki Atomi: "Rubisco from the hyperthermophilic archaeon, Thermococcus kodakaraensis."Methods in Enzymol.. 331. 353-365 (2001)
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[Publications] Haruyuki Atomi: "ATP-citrate lyase from the green sulfur bacterium Chlorobium limicola is a heteromeric enzyme composed of two distinct gene products"Eur.J.Biochem.. 268(6). 1670-1678 (2001)