2000 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
11460032
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
松井 博和 北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (90109504)
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Keywords | グリコシダーゼ / デキストラナーゼ / α-グルコシダーゼ / グランチングエンザイム |
Research Abstract |
・デキストラナーゼ:isomaltotrio-dextranase遺伝子の近停にα-glucosidase遺伝子が見つかり、これらが連動して働いていることが判明した。glucodextranaseの大腸菌における高発現に成功し、各種変異体酵素の作成が可能となった。α-1.6とα-1.4認識の酵素領域の解析のためにクロストリジウムよりglucoamylase遺伝子をクローニングし、解析中である。 α-グルコシダーゼ:アルカリpHで良く作用するα-glucosidase の存在を明らかにし、ほぼ精製された標品を手にした。これはこれまでの酸性および中性α-glucosidaseと比較しながら研究が進められるが、アルカリ酵素の発見は世界で初めてである。 ブランチングエンザイム:植物種子より枝付け酵素branching enzymeを単離精製し性質を明らかにするとともに、2種のcDNAを取得した。互いに相同性は50%であった。α-アミラーゼファミリーで保存されている4つの領域を中央部に持っており、そのN未側およびC未側について、アイソザイム間でキメラを作成し、基質特異性および生成物特性の面から研究と進めた。
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[Publications] T.Ishii ら: "Enzymatic Synthesis of Nonreducing Trisaccharide Containg Both Lactose and Trehalose As a Part of Structure."Journal of Applied Glycoscience. 47. 193-196 (2000)
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[Publications] T.Takayanagi ら: "Evidence for a Single Active Site on Isomalto-dextranase with Hydrolysis Activities of α-1.6-and α-1.4-Glucasidic Linkages."Journal of Applied Glycoscience. 48. 55-61 (2001)
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[Publications] K.Nozaki ら: "Major Isoforms of Starch Branching Enzymes in Premature Seeds of Kidney Bean"Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. 65No.5(in press). (2001)
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[Publications] T.Mizuno ら: "Isolation and Sequence of α-Glucosidase Gene from Brevibacterium fuscum var.dextrannticum strain 0407"Journal of Applied Glycoscience. 48No.3 (in press). (2001)
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[Publications] 松井博和: "バイオミメティックス ハンドブック 「デンプン生合成」"エヌ・ティー・エス. 5 (2000)