ヒトEBvirus発癌の動物モデル・サルEBV関連virusによる家兎悪性リンパ腫発生機構

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11470058
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 林 一彦 岡山大学, 医学部, 助教授 (30180962)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡 剛史 岡山大学, 医学部, 助手 (50160651) ; 近藤 英作 岡山大学, 医学部, 助手 (30252951)
• Keywords: EBウイルス / 悪性リンパ腫 / ウサギ / サル

Research Abstract

1.in vitroのEBV関連ウイルスによる家兎リンパ球immortalization/transformation系の確立とその性状の検討
家兎の脾臓や末梢血リンパ球にサルEBVをミリセルを用いてin vitroで感染させて形質転換した2株のcharacterizationの結果、これらはB cell系の形質を有し、EBVの潜伏感染遺伝子のEBNA1とEBNA2の両方が陽性のtype IIIのEBV潜伏感染型を示した。培養液に各ウサギの実験前の正常血清を加えて樹立した2株以外には追加の株を樹立させることはできなかった(学会発表準備中)。
2.EBV関連ウイルスDNAのシークエンス解析
重要なヒトEBVの遺伝子EBNA1と相同領域DNAを、三種類のカニクイザル由来EBV(Cyno-EBV,Si-IIA-EBV,HVMF1)を用いてPCRで増幅し、sequencingを行い、ヒトEBV-EBNA1や他種のサルのもつえEBV関連ウイルスのEBNA1 homologueとの相同性をDNAとアミノ酸配列で比較した結果、Si-IIA-EBVとCyno-EBVはヒトEBV-EBNA1とそれぞれ53%、58%のアミノ酸の相同性を示した。これらをデータベースに登録(DNA Data Bank of Japan,AB037275:AB037276;AB037277)するとともに、ヒトEBVと種々のサル関連EBVのEBNA1の相互の相同性に基づく系統樹を作製して、論文に投稿中である。
3.ヒトへのサル由来EBV関連ウイルスの感染性の検討
多数のヒトの悪性リンパ腫や反応性リンパ節症例のDNAを用いて,サル由来EBV関連ウイルスのみを検出するEBNA1領域のprimersでPCRを行った結果、人体材料におけるカニクイザル由来EBV関連ウイルスのDNAの存在は証明できなかった。

Research Products

• [Publications] K. Hayashi, H-L Chen et al.: "Cyno-EBV(EBV-related herpesvirus from Cynomolgus Macaques) induces rabbit malignant lymphomas and their tumor call lines frequently show specific chromosomal abnormalities"Lab. Invest.. 79(7). 823-835 (1999)
• [Publications] 林 一彦、赤木 忠厚: "EBVによる悪性リンパ腫の動物モデル"血液フロンティア. 9(9). 35-42 (1999)