1999 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
11470078
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
Principal Investigator |
半田 宏 東京工業大学, フロンティア創造共同研究センター, 教授 (80107432)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 肇 東京工業大学, 生命理工学, 助手 (80212322)
有坂 文雄 東京工業大学, 生命理工学, 助教授 (80133768)
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Keywords | SV40 / AAV / カプシドタンパク質 / ウイルス粒子様粒子 / 組み換えプラスミド |
Research Abstract |
SV40やAAVのカプシドタンパク質はVP1、VP2、VP3の3種類があり、野性型ウイルス粒子のの主要なコンポーネントは、SA40ではVP1、AAVではVP3である。我々は、これまでにバキュロウイルス発現系を用いて、SV40のカプシドタンパク質VP1を単独発現した場合と、AAVのカプシドタンパク質の場合はVP2とVP3の両方を共発現したときに昆虫細胞内にウイルス粒子様粒子(VLP)が形成されることを明らかにしてきた。またVLPを回収率よく精製し、それを試験管内で分散させて粒子を再構築させるのに必要な諸因子を明らかにしてきた。それらカプシドタンパク質を遺伝子工学的に改変を行って、それらの再分散化や集合化に関する機能ドメインをアミノ酸レベルで解明した。また細胞染色体への組み込みなどベクターとして要求される機能を持つ組み換えプラスミドが、カプシドタンパク質から成るカプセル内に効率よく包含される諸条件を検討した。(J.Virology,1999.p7912-7915)
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[Publications] Y.Yamaguchi et.al.: "NELF,a multisubunit complex containing RD,cooperates with DSIF to repress RNA polymerase II elongation"Cell. 97. 41-51 (1999)
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[Publications] B.R.Cairns et.al.: "Two functionally distinct forms of RSC nucleosome-remodeling complex,containing essential AT hook,BAH,and bromodomains"Mol.Cell. 4・5. 715-723 (1999)
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[Publications] A.M.Dudley,C.Ragelle,&F.Winston: "The Spt components of SAGA facilitate TBP binding to a promoter at a post-activator-brinding step in vivo"Genes Dev.. 13・22. 2940-2945 (1999)
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[Publications] P.B.Kamaruitsky,B.Michel & S.Buratowski: "TFIIO-specitic yeast TAF40 is essential for the majority of RNA polymerase II-mediated transcription in vivo"Genes Dev. 13. 2484-2489 (1999)
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[Publications] C.R.Rodriguez et.al.: "Kin 28,the TFIIH-associated carboxy-terminal domain Kinase,facilitate the recruitment of mRNA processing in machinery to RNA polymene II"Mol.Cell.Biol. 20. 104-112 (2000)
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[Publications] M.Hogue,H.HANDA et.al.: "Nudear Transport of the Major Capsid Protein is Essential for Adeno-Associated Virus Capsid Formation"Journal of Virology. 73. 7912-7915 (1999)
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[Publications] 半田 宏 共著: "環境ホルモン汚染対策〜測定・評価から企業対応まで〜"株)エヌ・ティー・エス. 426 (1999)
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[Publications] 村松正實 山本 雅 編: "実験医学別冊新訂 新遺伝子工学ハンドブック改訂第3版"羊工社. 360 (1999)