2001 Fiscal Year Annual Research Report

肺の微小血管内皮細胞のcDNA作製と特異プローブの検討

Research Project

Project/Area Number	11470143
Research Institution	Nippon Medical School
Principal Investigator	川並汪一日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (70096973)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	藤原正和日本医科大学, 老人病研究所, 助手 (20312069) 金恩京日本医科大学, 老人病研究所, 助手 (10312068) ガジザデモハマッド日本医科大学, 老人病研究所, 助教授 (30190979) 江見充日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (90221118) 太田成男日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (00125832)
Keywords	肺胞毛細血管 / 血管内皮細胞 / VEGF / KDR / Flt / laser capture microdissection / confocal laser scanning microscope / RT-PCR
Research Abstract	特発性間質性肺疾患、膠原病肺、過敏性肺炎など間質性肺疾患の研究を上皮細胞や線維芽細胞のレベルから血管系の変化に注目してきた。この領域での形態学的研究は未だ緒についたところであり多くの困難が付きまとうものの次のような仮説の元に諸課題に一定の解決策を見出すことが出来た。 1)肺腺癌で肺胞壁の基本構造を保存した原発性肺腺癌では、肺胞に間質性線維化を伴うことがまれでない。この点に注目し血管の正常との違いを検索した。2)正常ならびに肺癌のヒト肺微小血管内皮細胞、肺脈内皮細胞、肺小静脈、気管支循環系微小血管内皮細胞などを目標に、Vascular endothelial growth factor-(VEGF)receptor(KDR,Flt)、thrombomodulin,von Willebrand factorなどの抗体を用いconfocal laser scanning microscopeにて免疫組織学的にその性状を明らかにした。3)laser capture microdissection法により、正常ならびに原発性肺腺癌細胞の浸潤した肺胞壁をそれぞれ別個に採取した。正常肺胞からは毛細血管、周皮細胞、線維芽細胞、肺胞上皮細胞を取り出した。担癌肺胞壁はさらに腺癌細胞が加わった細胞構成をなす。これらのRNAから、cDNAを作成してRT-PCRを実施し、VEGFのisoformを分析した。またKDR,Fltの発現量を算定した。その結果、担癌肺胞壁では内皮細胞が活発に成長因子VEGF_<165>を発現しつつ内皮細胞はその受容体KDRをupregulateしている事実を把握した。多くの症例で肺胞壁は間質性肺炎で見る線維化傾向を示した。このような結果は癌細胞を再生上皮細胞に置換して仮定することで、線維化肺における内皮細胞の役割を想定できるものと思われた。cDNA作製後の特異プローブに関しては、セリンプロテアーゼに注目しprotease-activated receptorとの関連で推進できた。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Fujiwara M., Jin E. et al.: "An in vitro model to evaluate regulatory mechanisms of antigen expression by normal pulmonary vessel endothelial cells"Microvasc Res.. 61・2. 215-219 (2001)
[Publications] Jin E., Fujiwara M., Nagashima M., Shimizu H., Ghazizadeh M. et al.: "Aerogenous spread of primary lung adenocarcinoma induces ultrastructural remodeling of the alveolar capillary endothelium"Human Pathology. 32・10. 1050-1058 (2001)
[Publications] Jin E., Ghazizadeh M., Fujiwara M., Nagashima M. et al.: "Angrogenesis and phenotypic alteration of alveolar capillary endothelium in areas of neoplastic cell spread in primary lung adenocarcinoma"Pathology International. 51・9. 691-700 (2001)
[Publications] 川並汪一, 持丸博, 新井悟: "シリカの経気道投与による肺胞とその毛細血管のリモデリング"エアロゾル研究. 16・4. 285-288 (2001)
[Publications] Yamano G., Funahashi H., Kawanami O. et al.: "ABCA3 is a lamellar body membrane protein in human lung alveolar type II cells(1)"FEBS Lett.. 16・508. 221-225 (2001)
[Publications] 金恩京, 川並汪一: "気道と肺の微小血管内皮細胞"細胞. 33・4. 136-140 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

肺の微小血管内皮細胞のcDNA作製と特異プローブの検討

Principal Investigator

川並 汪一 日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (70096973)

Research Products

[Publications] Fujiwara M., Jin E. et al.: "An in vitro model to evaluate regulatory mechanisms of antigen expression by normal pulmonary vessel endothelial cells"Microvasc Res.. 61・2. 215-219 (2001)

[Publications] Jin E., Fujiwara M., Nagashima M., Shimizu H., Ghazizadeh M. et al.: "Aerogenous spread of primary lung adenocarcinoma induces ultrastructural remodeling of the alveolar capillary endothelium"Human Pathology. 32・10. 1050-1058 (2001)

[Publications] Jin E., Ghazizadeh M., Fujiwara M., Nagashima M. et al.: "Angrogenesis and phenotypic alteration of alveolar capillary endothelium in areas of neoplastic cell spread in primary lung adenocarcinoma"Pathology International. 51・9. 691-700 (2001)

[Publications] 川並汪一, 持丸 博, 新井 悟: "シリカの経気道投与による肺胞とその毛細血管のリモデリング"エアロゾル研究. 16・4. 285-288 (2001)

[Publications] Yamano G., Funahashi H., Kawanami O. et al.: "ABCA3 is a lamellar body membrane protein in human lung alveolar type II cells(1)"FEBS Lett.. 16・508. 221-225 (2001)

[Publications] 金 恩京, 川並汪一: "気道と肺の微小血管内皮細胞"細胞. 33・4. 136-140 (2001)

川並汪一日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (70096973)

[Publications] 川並汪一, 持丸博, 新井悟: "シリカの経気道投与による肺胞とその毛細血管のリモデリング"エアロゾル研究. 16・4. 285-288 (2001)

[Publications] 金恩京, 川並汪一: "気道と肺の微小血管内皮細胞"細胞. 33・4. 136-140 (2001)