1999 Fiscal Year Annual Research Report

筋ジストロフィー骨格筋に誘導されたユートロフィンの発現機構の解明と治療への応用

Research Project

Project/Area Number	11470153
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Research Institution	National Center of Neurology and Psychiatry
Principal Investigator	武田伸一国立精神・神経センター, 神経研究所・遺伝子工学研究部, 室長 (90171644)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	埜中征哉国立精神・神経センター, 神経研究所・微細構造研究部, 部長 (80040210)
Keywords	ユートロフィン / ジストロフィン / mdx mice / DMD / アデノウイルスベクター / 免疫反応 / サイトカイン / 炎症反応
Research Abstract	我々は骨格筋に対するアデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入法を確立する過程でDuchenne型筋ジストロフィーのモデル動物でジストロフィンを欠損しているmdxマウス骨格筋にアデノウイルスベクターを導入したところ、筋変性及び再生筋線維に認められる中心核線維が減少し、表現型が改善していることを見い出した。更に、この現象はウイルスベクターを用いて遺伝子導入を行った場合に遺伝子産物に対する免疫反応が起こり、ジストロフィンのホモログであるユートロフィンの発現が増強されることによって引き起こされたことを明らかにした(Hum Gene Ther,in press)。ユートロフィンの発現増強について詳細に検討したところ、通常見い出される神経筋接合部における発現とは態度が異なるため、従来型とは異なる転写産物から起因していることが予想された。そこで、5'RACE法を用いてユートロフィン転写産物の5'端を検討した。その結果、神経筋接合部で発現している従来型とは異なる新たな2つのユートロフィン遺伝子の5'端を見い出した。そのうち一つは1999年12月にイギリスのグループから報告されたものと同一のもので(Proc Natl Acad Sci USA.96,14025-14030,1999)、もう一つは全く未知の塩基配列を示していた。今後この転写産物のプロモーター解析を行い、アデノウイルスベクターにより誘導されるユートロフィンの発現機構との関係を検討する。また、ユートロフィンの発現誘導の主因となる免疫機構を明らかにするため、個々のサイトカインをマウス骨格筋に導入し、ユートロフィンの発現増強の再現を試みた。現在までにT細胞系Th1サブセットに関与するIFN-γ、IL-12を投与したが、ユートロフィンの発現増強は見い出されなかった。今後T細胞系Th2サブセットに関与するIL-4、10などの投与について検討する一方で、バイオマテリアルの利用を含めてサイトカインの長期分泌実験について検討する。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Inobe M. et al.: "Identification of EPS8 as a Dvl1 associated molecule"Biochem Byophys Res Commu. 266. 216-221 (1999)
[Publications] Miyagoe-Suzuki Y. et al.: "Merosin and congenital muscular dystrophy"Microscopy Research and Technique. 48. 181-191 (2000)
[Publications] Takeda S.: "Gene Therapy of Muscular Dystrophy, Reality and Dream"Neuroscience News. 3. 51-56 (2000)
[Publications] Yokota T. et al.: "Aquaporin-4 is absent at the sarcolemma and at perivascular astorocyte..."Proc. Japan Acad. 7 6B. 13-28 (2000)
[Publications] Yamamoto K. et al.: "Immune response to adenoviral-delivered antigens upregulates utrophin..."Human Gene Therapy. (in press).
[Publications] 武田伸一: "脳科学における遺伝子治療の現状と将来像"脳の科学. 21. 1171-1181 (1999)
[Publications] 武田伸一、他: "筋肉細胞、遺伝子治療開発ハンドブック"株式会社エヌ・ティーエス. 1061 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

筋ジストロフィー骨格筋に誘導されたユートロフィンの発現機構の解明と治療への応用

Principal Investigator

武田 伸一 国立精神・神経センター, 神経研究所・遺伝子工学研究部, 室長 (90171644)

Research Products

[Publications] Inobe M. et al.: "Identification of EPS8 as a Dvl1 associated molecule"Biochem Byophys Res Commu. 266. 216-221 (1999)

[Publications] Miyagoe-Suzuki Y. et al.: "Merosin and congenital muscular dystrophy"Microscopy Research and Technique. 48. 181-191 (2000)

[Publications] Takeda S.: "Gene Therapy of Muscular Dystrophy, Reality and Dream"Neuroscience News. 3. 51-56 (2000)

[Publications] Yokota T. et al.: "Aquaporin-4 is absent at the sarcolemma and at perivascular astorocyte..."Proc. Japan Acad. 7 6B. 13-28 (2000)

[Publications] Yamamoto K. et al.: "Immune response to adenoviral-delivered antigens upregulates utrophin..."Human Gene Therapy. (in press).

[Publications] 武田伸一: "脳科学における遺伝子治療の現状と将来像"脳の科学. 21. 1171-1181 (1999)

[Publications] 武田伸一、他: "筋肉細胞、遺伝子治療開発ハンドブック"株式会社 エヌ・ティーエス. 1061 (1999)

武田伸一国立精神・神経センター, 神経研究所・遺伝子工学研究部, 室長 (90171644)

[Publications] 武田伸一、他: "筋肉細胞、遺伝子治療開発ハンドブック"株式会社エヌ・ティーエス. 1061 (1999)