2000 Fiscal Year Annual Research Report
アポトーシス促進因子baxを用いたPTCA後再狭窄に対する遺伝子治療の可能性-バルーン障害後の内膜平滑筋細胞増殖に伴うintimal hyperplasiaの予防-
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11470160
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
藤原 久義 岐阜大学, 医学部, 教授 (80115930)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹村 元三 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (40283311)
岡野 幸雄 岐阜大学, 医学部, 教授 (10177066)
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| Keywords | ラット頚動脈 / バルーン障害モデル / bax mRNA / 遺伝子治療 / アポトーシス / 増殖能 |
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| Research Abstract |
本年度(平成12年度)はラット頚動脈バルーン障害内膜増殖モデルを作成し、bax遺伝子導入を行い、intimal hyperplasiaの予防が可能かを検討した。遺伝子導入はアデノウィルスベクターを用いて行い、バルーン障害後、1日、5日、14日、30日で屠殺し、ノーザンブロッティング法およびウエスターンブロッティング法により、bax mRNAおよびBax蛋白の経時的発現量を検討した。バルーン障害頚動脈組織標本を対象に内膜肥厚の程度はelastic van Gieson染色、抗アクチン抗体、抗マクロファージ抗体による免疫染色を行い、イメージアナライザーで検討した。アポトーシスはTUNEL法にて、増殖はPCNAにて検討した。その結果、以下のことが明らかになった。1)遺伝子導入しなかったコントロールと比較し、bax遺伝子の導入群ではバルーン障害頚動脈組織にbax mRNAおよびBax蛋白の発現増強がみられた。2)遺伝子導入しなかったコントロールと比較し、遺伝子の導入群ではintimal hyperplasia組織平滑筋細胞におけるTUNEL陽性細胞は増大したが、PCNA陽性細胞には変化がなかった。3)遺伝子導入しなかったコントロールと比較し、遺伝子の導入群でのintimal hyperplasiaの程度は改善傾向がみられたが、有意の所見は得られなかった。以上よりラット頚動脈バルーン障害に対するbax遺伝子の導入はintimal hyperplasia組織平滑筋細胞のアポトーシスを促進する。しかし、バルーン障害後の再狭窄予防効果があるか否かについては明瞭な結論が得られなかった。これは我々の用いた遺伝子導入の方法ではBaxの発現とアポトーシス誘導の程度がいまだ不十分であったためと考えられる。したがって再狭窄予防のためには今後、新しいより強力なベクターを開発し、より一層のbax遺伝子導入の効率化をはかり、アポトーシス細胞をさらに増大する必要があると思われる.
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Kunishima A, et al.: "Mode and role of cell death during progression of atherosclerotic lesions in hypercholesterolemic rabbits"Heart and Vessel. 14. 295-306 (1999)
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[Publications] Qiu X, et al.: "Gallic acid induces vascular smooth muscle cell death via hydroxyl radical production"Heart and Vessel. 15. 90-99 (2000)
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[Publications] Kanoh M, et al.: "The significance of expression of proliferating cell nuclear antigen in the cardiovascular system"Circulation. 101(5). e239-a (2000)
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[Publications] Ojio S, et al.: "Considerable time from the onset of plaque rupture and/or thrombi until the onset of acute myocardial infarction in human"Circulation. 102(5). 2063-2069 (2000)
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[Publications] Takemura G, et al.: "Characterization of ultrastructure and its relation with DNA fragmentaion in Fas-induced apoptosis of cultured cardiac myocytes"J Pathol. (in press).
