チトクロームCオキシダーゼアンチセンスRNAの抗腫瘍効果に関する研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11470207
• Research Institution: Teikyo University
• Principal Investigator: 白藤 尚毅 帝京大学, 医学部, 助教授 (00206301)
• Keywords: ミトコンドリア / チトクロームCオキシダーゼ / アンチセンスRNA / 抗腫瘍効果 / 白血病

Research Abstract

lipofectin法を用いたMARCO : mitochondrial antisense RNA for cytochrome c oxidaseのin vivo効果の検討。MARCO発現プラスミドをlipofectin法を用いてマウスB細胞白血病株MOPC、T細胞白血病株EL-4、及び骨髄単球性白血病細胞株WEHI-3Bに遺伝子導入を行なった。導入効率は10%程度であったが、in vitroでの細胞死誘導能を細胞数で経時的に観察したところコントロールと比較して有為に減少が確認された。次にin vivoでの後抗腫瘍効果を担癌マウスに腹腔内、及び経静脈投与して観察すると、MARCOをlipofectin法で3日間投与した群では、いずれの細胞の担癌マウスにおいても4週程度の生存率の延長が認められた。2週間投与では、3カ月以上の生存延長が観察された。投与量依存性も確認された。生存率の上昇は、経静脈投与、及び白血病芽球腫への直接投与においても同様に観察された。副作用は、lipofectin投与12時間から24時間後の白球数の低下のみで、主要臓器への影響は病理組織像でも認められなかった。Adex法を用いたMARCOのin vivo効果。Adenovirus由来cosmid shattle vectorを用いてrecombinant Adex-MARCO virusを作成し、上述のマウス白血病細胞株に対するin vitro遺伝子導入効率は観察したところ約50%程度であった。in vitro,in vivo抗腫瘍効果をAdex法とlipofectin法とで比較したところ、ともにliposome法がAdex法に勝っていた(白藤、他。投稿中)。Promoter置換による腫瘍細胞特異的なMARCOの発現。Lck promoterでMARCOが発現するプラスミド、ImmunoglobulinのpromoterでMARCOが発現するプラスミドを作成、その発現効率、抗腫瘍効果、選択特異性を現在解析中である。

Research Products

• [Publications] T. Yamamoto, etal: "P73 is highly expressed in mycepithelial cells"International Journal of Oncology. 19. 271-276 (2001)
• [Publications] S. Matsuda, etal: "Cloning and sequencing of a novel human gene"Journal of Human Genetics. 46. 483-486 (2001)
• [Publications] J. ooi etal: "unrelated cerd blood from splantation for adult patients"British Journal of Haematology. 114. 834-386 (2001)
• [Publications] A. Tomonari: "Severe autoimmune throwbocytopenia after allo-BMT"International Journal of Hematology. 74. 228-232 (2001)