Chkチロシンキナーゼ過剰発現による血液細胞多核化現象の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11470212
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: University of Shizuoka
• Principal Investigator: 山口 直人 静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (00166620)
• Keywords: Src型チロシンキナーゼ / Csk / Csk homolosous kinase(Chk) / 多核化 / 細胞内局在 / 細胞増殖 / 染色体 / チロシンリン酸化

Research Abstract

Src型チロシンキナーゼは、増殖因子などの刺激によって活性上昇を起こし、C-terminal Src kinase(Csk)により抑制的に調節される。我々は、Chk(Csk homologous kinase)とCskとのファミリー形成、血液細胞におけるCskとChkの共発現、トロンビン刺激血小板におけるChkによるSrc型キナーゼLyn選択的抑制機構を明らかにしてきた。また、Chkが、フィブロネクチン-VLA5インテグリン依存性細胞伸展に必要なLynの活性を選択的に制御することを示した。本研究では、Src型キナーゼの細胞内存在位置が機能に重要な役割をもつことを考慮し、血液系以外の細胞において、Src型キナーゼの細胞内局在を調べたところ、線維芽細胞株C0S-1細胞は、Lynが細胞膜の他に核に発現していた。ChkをC0S-1細胞に発現させて、共焦点レーザー蛍光顕微鏡を用い局在を調べたところ、細胞質のみならず核にも一部存在することが分かった。Chkの3種類の欠失変異体、SH2欠失(ChkΔSH2)・SH3欠失(ChkΔSH3)・N末端領域欠失(ChkΔN)変異体を作製してC0S-1細胞に発現させて局在を調べたところ、大部分のChkΔSH2は核に局在し、ChkΔSH3・ChkΔNは主に細胞質に発現していた。ChkΔSH2の核内での発現は、多形核化・多核化を高頻度に誘導し、細胞増殖を抑制した。したがって、この多核化は、Chk過剰発現した血液系細胞株で観察されたものと類似しているものと考えられた。

Research Products

• [Publications] Tada J: "A common signaling pathway via Syk and Lyn tyrosine kinases generated from capping of the sialomucins CD34 and CD43 in immature hematopoietic cells"Blood. 93. 3723-3735 (1999)
• [Publications] Mera A: "Induction of cell shape changes through activation of the interleukin-3 common beta-chain receptor by the RON receptor-type tyrosine kinase"J.Biol.Chem.. 274. 15766-15774 (1999)
• [Publications] El-Shazly A: "Novel association of the Src family kinases,Hck and c-Fgt,with CCR3 receptor stimulation :a possible mechanism for eotaxin-induced human eosinophil chemotaxis"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 264. 163-170 (1999)
• [Publications] Takikawa M: "Suppression of GD1α ganglioside-mediated tumor metastasis by liposomalized WHW-peptide"FEBS Lett.. 466. 381-384 (2000)