テロメラーゼをターゲットとした神経芽細胞腫の診断と治療 -臨床応用にむけて-

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11470368
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 桧山 英三 広島大学, 医学部・附属病院, 講師 (00218744)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山岡 裕明 広島大学, 医学部・附属病院, 助手 (90311810) ; 村上 義昭 広島大学, 医学部・附属病院, 講師 (10263683) ; 横山 隆 広島大学, 医学部・附属病院, 教授 (60034104)
• Keywords: 神経芽細胞腫 / テメロメラーゼ / テロメア / hTR / hTERT / 予後 / MYCN

Research Abstract

神経芽細胞腫は,退縮,分化に向かう予後良好なfavorable腫瘍と,悪性度が高く進行の早い予後不良のunfavorable腫瘍に分かれる。神経芽細胞腫(241症例の凍結組織標本)のテロメア長,テロメラーゼ活性に加え,テロメラーゼの構成成分であるhuman telomerase RNA component(hTR)、human telomerase reverse transcriptase(hTERT)、human telomerase assciated protein 1(hTEP1)発現を同一症例で検討した結果,テロメラーゼ高活性腫瘍はhTR,hTERTも高発現であったが,hTEP1はすべての腫瘍に恒常的に発現していた.テロメラーゼ低活性及び活性のない腫瘍にもhTRの低い発現をみとめ一部にhTERT高発現を認めたが,これらのhTERTはsplicing variantsであった.今回,購入した蛍光サーマルサイクラーを用いてテロメラーゼ活性,splicingのないhTERT発現の定量化を行うと,これらの発現レベルは相関しており,予後不良例で高値となった.他の腫瘍特性との関連を検討した結果,MYCN増幅,1p領域異常,NTRK1低発現と相関し,神経芽腫の診断治療に有用なBiomarkerであることが確認された.さらに,MYCN発現とhTERT発現との関連はMYCNがhTERTのプロモーター領域に作用している可能性が示唆された.テロメア長の検討では,テロメラーゼ活性,hTERT発現が極めて高い12例中10例が短縮しており,これらが高テロメラーゼ療法の適応症例であると考えられた.現在,神経芽腫細胞株12株にhTRに対するPNA,hTERTの antisense DNAを導入して継代し、継代ごとにテロメア長、テロメラーゼ活性、hTR,hTERT,hTEP1の発現の変化を検討し、増殖抑制効果の検討中である.

Research Products

• [Publications] Eiso Hiyama et al.: "Multifocal Neuroblastoma: Biological Features and Surgical Aspects"Cancer. (in press).
• [Publications] Murakarni Y. et al.: "Long-term survival of peripheral intrahepatic cholangiocarcinoma with metastasis to the para-aortic lymph nodes."Surgery. 126・2. 105-106 (2000)
• [Publications] Ciro Mendoza et al.: "Alle-lotype and loss of heterozygosity around the L-myc gene locus in primary lung cancers"Lung Cancer. (in press).
• [Publications] Eiso Hiyama et al.: "Rapid detection of gene amplification and telomerase expression in neuroblastoma."Clin. Cancer Res.. 5・3. 601-609 (1999)
• [Publications] Yujiro Yokoyama et al.: "Lack of CD44 variant 6 expression in advanced extrahepatic bile duct/ampullary carcinoma."Cancer. 86・9. 1691-1699 (1999)
• [Publications] Saeki T. et al.: "Inhibitory Effect of Telomere-Mimic Phosphorothioate Oligodeoxy Nucleotides (S-ODNS) on Human Tumor Cell Lines."Oncology. 57・suppl 2. 27-36 (1999)
• [Publications] 檜山英三,他.: "テロメラーゼと癌診断"医学のあゆみ. 191・3. 227-228 (1999)
• [Publications] 檜山英三,他.: "消化器癌とテロメラーゼ"消化器外科. 22・12. 1783-1789 (1999)
• [Publications] 檜山桂子,他: "テロメラーゼの測定"Lab. CIin. Pract.. 16・2. 148-155 (1999)
• [Publications] 檜山桂子,他: "肺癌におけるテロメア・テロメラーゼ"肺癌の臨床. 2・4. 485-492 (1999)
• [Publications] 檜山桂子,他: "肺癌における染色体テロメアとテロメラーゼ"臨床医. 25・8. 1550-1553 (1999)
• [Publications] 檜山英三 他.: "Annual Review 呼吸器"中外医学社. 275 (2000)
• [Publications] 檜山英三: "テロメア,テロメラーゼ."日本医学館,. 257 (1999)
• [Publications] 槍山英三,檜山桂子.: "がんとテロメア・テロメラーゼ"南山堂,. 131 (1999)
• [Publications] Hiyama E. et al.: "Telomerase as a biomarker and prognostic marker in neuroblastoma,"KEYWORD Ltd,. 628 (2000)