2000 Fiscal Year Annual Research Report
レチノイン酸受容体の遺伝子発現動態からみた直腸肛門奇形の胎生学的研究
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11470369
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
岩井 直躬 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (90128695)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
下竹 孝志 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (90254341)
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| Keywords | 直腸肛門奇形 / レチノイン酸 / 胎生学 |
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| Research Abstract |
本年度は、実験用マウスコロニーを確立後、Retinoic acid処理マウス胎仔切片におけるretinoic acid receptorの蛋白質レベルでの発現の検索を行った。採取した胎仔を4%パラホルムアルデヒド液にて12〜24時間固定し、クリオスタットにて矢状断あるいは水平断に薄切し、連続凍結切片とした。ここで抗RARα、RARβ、RARγ特異抗体を用いてABC法による染色を施行し、胎仔の全体像および消化管奇形、脊椎異常、直腸肛門奇形の病型を検索した。同時にRetinoic acid処理マウス胎仔におけるRARα、RARβ、RARγ geneの発現の検索をIn situ hybridizationを用いておこなった。probe配列を含むcDNAをSP6/T7/T3 promotorを有するpGEMベクタープラスミドにサブクローニングし、antisense probe、sense probeともにdigoxygeninにて標識した。胎仔組織切片によるin situ Hybridizationを抗digoxygenin抗体による抗体、およびDAB発色にて観察することに成功した。
その結果、これまでの所見では、胚を用いたimmuonhistochemistrsyならびにin situ Hybridization法双方において、中枢神経系や心血管系の発生分化過程のみならず、直腸肛門ならびに生殖器、泌尿器系においてもレチノイドシグナル伝達系における分子発生学的な発現異常の存在することを明らかにし結果を公表(publication)した。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Bitoh Y,Shimotake T, et al: "Impaired distribution of retinoic acid receptors in the hindgut-tailgut region of murine embryos with anorectal malformations."Journal of Pediatric Surgery. 36(2). 377-380 (2001)
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[Publications] Inoue K,Shimotake T, et al.: "Mutational analysis of the RET/GDNF/NTN genes in children with total colonic aganglionosis with small bowel involvement."American Journal of Medical Genetics. 93(4). 278-284 (2000)
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[Publications] Kubota Y,Shimotake T, et al.: "Congenital anomalies in mice induced by etretinate."European Journal of Pediatric Surgery. 10(4). 248-251 (2000)
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[Publications] Inoue K,Shimotake T, et al.: "Mutational analysis of the RET and GDNF genes in children with hypoganglionosis."European Journal of Pediatric Surgery. (in press).
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[Publications] Shimotake T.,Go S, et al.: "Ultrasonographic detection of intrauterine intussusception resulting in ileal atresia complicated by meconium peritonitis."Pediatric Surgery International. 16(1). 13-14 (2000)
