1999 Fiscal Year Annual Research Report
7番染色体ゲノム刷り込み遺伝子群の単離と子宮内成長に関わる遺伝子の同定
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11470507
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
新川 詔夫 長崎大学, 医学部, 教授 (00111170)
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| Keywords | ゲノム刷り込み / 7q32領域 / PAC / BACコンティグ / 発現地図 / 刷り込みドメイン / MEST遺伝子 / γ2-COP遺伝子 / 子宮内発育不全 |
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| Research Abstract |
1 7q32領域のPACクローンによるコンティグ構築:7q32領域には刷り込み遺伝子MESTが局在する。一方、7番染色体の母性片親性ダイソミー(UPD)は子宮内発育不全(IUGR)を起こす。刷り込み遺伝子は一般的にゲノム上で集合して存在するので、7q32領域における同様な遺伝子集合の有無を検討するため、MESTを含むコンティグを以下の様に構築した。(1)PACライブラリーのスクリーニングによってMESTを含むクローンの取得、(2)PACインサート端〜200bpの塩基配列決定、(3)配列からPCRプライマーの作成(新規STS)、(4)同ライブラリーのスクリーニング、(5)ステップ2〜5の繰り返す、(6)ギャップ部分はBACクローンで埋めた。結果として、2つのマーカーD7S530とD7S649間の〜1Mb領域にわたるコンティグを構築し、60個の新規STSを作成した。また、このコンティグ内に47個の遺伝子またはESTをマップした(Genomics投稿中)。この統合物理地図は新規刷り込み遺伝子の単離・同定に有用である。
2 7q32領域における刷り込み遺伝子の同定:MEST近傍には従来刷り込み遺伝子とされていたg2-COP遺伝子があるが、胎児組織における発現解析から、同遺伝子は両アレル発現であり刷り込みを免れること、同領域にある新規ESTコンティグ(stSG1728)はg2-COPの3'-UTRと逆向きに重なり、stSG1728はg2-COPのイントロン20のアンチセンス転写物であり、胎児組織では父性片アレル発現することを証明した。
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Research Products
(1 results)
