2000 Fiscal Year Annual Research Report
大腸菌の可視光感受性変異株を利用した高等植物のポルフィリン合成系遺伝子群の解析
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11480201
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
井口 八郎 京都大学, 大学院・理学研究科, 教授 (20028195)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中東 憲治 京都大学, 大学院・理学研究科, 助手 (70322740)
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| Keywords | イネ(Orgza sativa) / ダイズ(Glycine max) / 大腸菌(E.coli)のhemF遺伝子 / キューリ(Cucumis sativus) / チミジル酸合成酵素遺伝子 / ホウレンソウ(Spinacia oleracea) / フェロキレテース / プロトポルフィリノゲンIXオキシダーゼ |
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| Research Abstract |
1)イネ[Orgza sativa(L.indica,Var.IR36)]のcDNAライブラリーからThymidylate synthase遺伝子のクローンの単離に成功した[Kanjo ＆ Inokuchi,Plant Physiol.(Gene Register),120,634(1999)]。2)ダイズ[Glycine max(var.Resnik)]のcDNAライブラリーから、プロトポルフィリノゲンIXオキシダーゼ(PPOX)をコードするcDNAのクローンの単離に成功した。そのcDNAは1745塩基対からなり、プロトポルフィリノゲンIXオキシダーゼ(EC1.3.3.4)は502アミノ酸からなる。タバコのミトコンドリアのこの酵素とは67%、タバコのプラスチド25%、ヒト16%、大腸菌7%の相同性をもっていた。この酵素のN末端領域にはミトコンドリアへの移行シグナル配列がみられた[Kanjo et al.,Plant Physiol.(Gene Register),121,1384(1999)]。3)大腸菌のhemG欠失ミュータントより復帰ミュータントを分離し調べた。その変異はhemF遺伝子のプロモーター領域に見出された。大腸菌のHemF酵素は僅かながらプロトポルフィリノーゲンIXオキシダーゼ活性も有する。この復帰ミュータントはプロモーターの変異により酵素量が増すことによりhemGミュータントをovercomeできるようになったと推察した[Narita et al.,Mol.Gen.Genet.,261,1012-1020(1999)]。4)キューリ[Cucumis sativus L.cv.Aonagajibai]のフェロキレテースについて研究した。大腸菌で過剰発現させる系を作り、酵素を大量に精製し性質を調べた。またキューリの各種組織におけるこの酵素の局在性を調べた[Suzuki et al.,Plant Cell Physiol.,41,192-199(2000)]。5)ホウレンソウ[Spinacia oleracea L.cv Tonic]葉緑体のプロトポルフィリノーゲンオキシダーゼ(PPOX)について、分子的性質ならびに組織における局在性を調べた[Che et al.,Plant Physiol.,124,59-70(2000)]。
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[Publications] N.Kanjo & H.Inokuchi: "Nucleotide Sequence of cDNA clone encoding thymidylate synthase from sics."Plant Physcol(Gene Regioter). 120. 634-634 (1999)
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[Publications] S.Nasita et al.,: "Oxidation of Protoporphysinogen IX mediated by the E.coli aerobic coproposphysinogen oxidase"Molec.Gen.Genet.. 261. 1012-1020 (1999)
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[Publications] N.Kanjo et al.,: "Nucleotide sequence of cDNA clone encoding protoporphysinogen IX oxidase from soybean"Plant Physiol.(Gene Register). 112. 1384-1384 (1999)
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[Publications] T.Suzuki et.al.,: "Ouerepression, Enzymatic Propesties and tissue localization of a ferrochelatase of cucumber"Plant Cell Physiol.,. 41. 192-199 (2000)
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[Publications] F.Che et.al.,: "Molecular characterization subcellular localization PPOX in spinach chlosoplasts"Plant Physiol.,. 124. 59-70 (2000)
