2001 Fiscal Year Annual Research Report
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11490030
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
宮崎 香 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 教授 (70112068)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
東 昌市 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助手 (10275076)
安光 英太郎 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助教授 (10182346)
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| Keywords | ラミニン5 / インテグリン / 細胞接着 / 細胞運動 / 細胞移動 / ドメイン構造 / 細胞外マトリックス / 癌 |
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| Research Abstract |
ラミニン-5(LN5)はα3、β3及びγ2鎖からなる基底膜蛋白質の一種で、上皮組織の構築や機能の維持に重要な役割を果たしている。これまでに私たちは、LN5が非常に強い細胞接着活性と細胞運動活性を示すこと、LN5のα3とγ2鎖がプロテアーゼによって特定の位置で切断されることなどを明らかにした。本研究ではLN5の構造と機能の相関、プロテアーゼによるプロセシングの意義などを調べた。1)β3とγ2鎖のみを発現するヒト繊維肉腫細胞HT1080にα3鎖のcDNAおよびその変異体cDNAを強制発現させ、種々の組換え型LN5を産生させた。それらの性質を比較した結果、細胞接着活性と運動活性の発現にはα3鎖C末端部位のG3ドメインが必須であり、またこのドメインのC末端側半分には細胞接着と細胞運動を制御する異なる領域が存在することを明らかにした。2)LN5のγ2鎖N末端部位のプロセシングの意義を明らかにするえめに、切断部位に点突然変異を導入し、非切断型γ2鎖をもつ組換えLN5を作製した。その結果、非切断型LN5は切断型γ2鎖をもつ天然LN5に比べ、細胞接着活性が高くて、細胞運動活性が低いことが分かった。この結果は、LN5の限定分解に伴う細胞運動活性の上昇が組織の修復やがん細胞の基底膜浸潤に関係することを示唆する。3)上記のα3鎖cDNAを導入したHT1080がLN5に加え、これまで全く性質が明らかにされていないLN6(α3、β1、γ1)を分泌することを見いだした。そこでこの分子を初めて単離し、性質を調べた。LN6はLN5とほぼ同等の細胞接着活性をもつが、LN5のような細胞運動活性を示さないことが明らかになった。以上の結果から、LN5の活性発現にはα3鎖のG3ドメインが重要であるが、γ2鎖N末端部位、おそらくβ3鎖もその活性に強く影響することが明らかになった。また、生体内でのLN5とLN6の強調作用を示す結果も得られている。
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[Publications] Kagesato, Y., Miyazaki, K.et al.: "Sole expression of laminin g2 chain in invading tumor cells and its assoication with stromal fibrosis in lung adenocarcinomas"Jpn. J. Cancer Res.. 92. 184-192 (2001)
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[Publications] Adachi, Y., Miyazaki, K.et al.: "Expression of angiomodulin (TAF/Mac 25) in invading tumor cells and blood vessels correlates with tumor progression and poor prognosis in human colorectal cancers"Int. Cancer Res.. 95. 216-222 (2001)
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[Publications] Jin, M., Miyazaki, K.et al.: "Expression of serine proteinase inhibitor PP5/TFPI-2/MSPI decreases invasive potential of human choriocarcinoma cells in vitro and in vivo"Gynecol. Oncol.. 83. 325-333 (2001)
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[Publications] Nishikwa, I., Miyazaki, K.et al.: "Matrilysin stimulates DNA synthesis of cultured vascular endothelial cells and induces angiogenesis in vivo"Cancer Lett.. 173. 175-182 (2001)
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[Publications] Huo, H., Miyazaki, K.et al.: "MMP-7 (matrilysin) accelerated growth of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs)"Cancer Lett.. 177. 95-100 (2002)
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[Publications] Mizushima, H., Miyazaki, K.et al.: "Expression of laminin-5 enhances tumorigenicity of human fibrosarcoma cells in nude mice"Jpn. J Cancer Res.. (in press).
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[Publications] 宮崎香, 森山佳谷乃: "バイオサイエンスの新世紀。第8巻:多細胞体の構築と細胞接着システム(関口清俊, 鈴木信太郎 編)"共立出版(分担). 174-186 (2001)
