2002 Fiscal Year Annual Research Report
酵母の変異形質に基づく生理活性物質スクリーニング系の構築と利用
Project/Area Number |
11556017
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Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
Principal Investigator |
宮川 都吉 広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 教授 (10116676)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 英俊 雪印乳業(株), 生物科学研究所, 主任研究員
平田 大 広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (30243603)
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Keywords | 酵母 / カルシニューリン / Ca^<2+>シグナル / 薬剤スクリーニング |
Research Abstract |
初年度において、確立したスクリーニング法を利用し、ケミカルライブラリー(メイブリッジ)のスクリーニングを行った。約8,200種類の化合物のスクリーニングから、6種化合物が取得されたが、うち一番強い活性を与えた化合物16C2について、作用部位の特定を行った。本物質はCa^<2+>存在下のzds1破壊株の増殖を顕著に促進した。本物質がカルシニューリン経路またはMAPキナーゼ経路のいずれを阻害するかを推定する実験を行った。本物質に対し野生株酵母は殆ど感受性を示さなかったが、Mpk1破壊株がカルシニューリン破壊株に比べて強い感受性を示したことから、カルシニューリン経路への作用を予想した。カルシニューリン高発現株が示す増殖阻害などの表現型もきれいに抑圧した。カルシニューリン阻害を予想し、カルシニューリン活性に及ぼす影響を調べたが阻害効果はみられなかった。カルシニューリン経路の下流に位置するSwe1pについて調べると、16C2はSWE1高発現の影響を抑圧しSwe1タンパク質レベルを低下させることがわかった。Swe1タンパク質を不安定化する事が予想された。さらに作用点の詳細を明らかにする研究を続けている。また、動物細胞に対しての作用の検討も行っている。
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[Publications] Yuji Miyamoto et al.: "Identification of Saccharomyces cerevisiae isoeucyl tRNA synthetase as target of G-1 -specific inhibitor reveromycin A"J. Biol Chem.. 277. 28810-28814 (2002)
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[Publications] Dai Hirata et al.: "Fission yeast Mor2/Cps12, a protein similar to Drosophila Furry, is essential for cell morophogenesis and its mutation induces Wee1-dependent G_2 delay"EMBOJ.. 21. 4863-4874 (2002)
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[Publications] Daisuke Morita et al.: "Rpf2p, an evolutionarily conserved protein, interacts with ribosomal protein L11 and is essential for the processing of 27 SB pre-rRNA to 25 S rRNA"J. Biol. Chem.. 277. 28780-28786 (2002)
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[Publications] Koji Kakugawa et al.: "Cloning, characterization, and expression of cDNA encoding a lipase from Kurtzumanomyces sp. I-11"Biosci. Biotechnol. Biochem. 66. 1328-1336 (2002)
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[Publications] Koji Kakugawa et al.: "Purification and characterization of a lipase from the glycolipid-producing yeast Kurtzurnanomyces sp. I-11"Biosci. Biotecimol. Biochem.. 66. 978-985 (2002)
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[Publications] Koji Kakugawa et al.: "Isolation of yeast Kurtzumanomyces sp. I-11, novel producer of mannosylerythritol lipid"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 188-191 (2002)
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[Publications] 下向敦範 ほか: "清酒酵母の研究(分担執筆)"清酒酵母研究会. 8 (2003)