2000 Fiscal Year Annual Research Report

アニオン性薬物トランスポーターのクローニングと薬物動態解析への応用

Research Project

Project/Area Number	11557005
Research Institution	Kyorin University
Principal Investigator	金井好克杏林大学, 医学部, 助教授 (60204533)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	細山田真杏林大学, 医学部, 助手 (00291659) 武田理夫杏林大学, 医学部, 講師 (40255401) 遠藤仁杏林大学, 医学部, 教授 (20101115) 車碩鎬杏林大学, 医学部, 助手 (50276200)
Keywords	トランスポーター / 有機アニオン / 有機カチオン / 薬物輸送 / 薬物動態 / 血液・組織関門 / 腎 / 分子クローニング
Research Abstract	本研究は、アニオン性薬物の体内動態において中心的な役割を果たす有機アニオントランスポーターOATファミリーの未同定のメンバーをさらにクローニングし、それも加えたOATファミリーのヒト型トランスポーターの機能解析、及び臓器での発現の局在の検討を行ない、OATファミリーの薬物動態における意義を評価することを目的とする。平成12年度は、既に得られているOAT1〜4の配列を基に、EST(expressed sequence tag)データベースを検索し、3種のOAT類似新規部分配列(ESTa、ESTb、ESTc)を同定した。各々の塩基配列に相当するプローブを用いて全長cDNAを単離し、ツメガエル卵母細胞に発現させ機能解析を行った。その結果、ESTa及びESTbの二者において機能活性が得られ、両者ともに有機イオントランスポーターファミリー他のメンバーと重複する基質選択性を示すことが明らかになり、本ファミリーのメンバーの多様性と基質選択の重複性が再度確認された。これらのヒト型ホモログの安定発現細胞株を樹立する作業が進行中である。OATファミリーのヒト型ホモログの安定発現細胞株を用いた薬物動態のin vitroでの評価系を確立するためには、ファミリーの各メンバーの安定発現細胞株を用いた詳細な薬物輸送のスペクトラムに関する情報を蓄積させることが必要であるため、本年度は、hOAT1〜4安定発現細胞株を用い、構造の異なる多数の化合物(βラクタム系抗生物質、NSAIDs、利尿薬、抗ウイルス薬などの酸性薬物およびその代謝物、環境毒素、内因性有機アニオン等)の輸送活性及び輸送のキネティクスの系統的な解析を行なった。さらに、特異抗体を用いた排泄臓器や血液・組織関門における局在の検討も進行させており、OAT1及びOAT3が腎尿細管側基底側膜に存在し、OAT4は管腔側膜に存在すること等が明らかになっている。

Research Products
(16 results)

All Other

All Publications (16 results)

[Publications] Fukasawa,Y: "Identification and characterization of a Na+-independent neutral amino acid transporter that associates with the 4F2 heavy chain and exhibits substrate selectivity for small neutral D-and L-amino acids."J.Biol.Chem.. 275. 9690-9698 (2000)
[Publications] Nakajima,N: "Developmental changes in multispecific organic anion transporter 1 expression in the rat kidney."Kidney Int.. 57. 1608-1616 (2000)
[Publications] Kanai,Y.: "Transport properties of a system y+L neutral and basic amino acid transporter : Insights into the mechanisms of substrate recognition."J.Biol.Chem.. 275. 20787-20793 (2000)
[Publications] Nakauchi,J: "Cloning and characterization of a human brain Na+-independent transporter for small neutral amino acids that transports D-serine with high affinity."Neurosci.Lett.. 287. 231-238 (2000)
[Publications] Ishii,H: "Involvement of rBAT in Na+ -dependent and -independent transport of the neurotransmitter candidate L-DOPA in Xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium poly A+RNA."Biochim.Biophys.Acta. 1466. 61-70 (2000)
[Publications] Matsuo,H: "Mouse A sc-1(asc-type amino acid transporter 1) maps to chromosome 7,region B1-B5."Chromosome Res.. 8. 456 (2000)
[Publications] Wada,S: "Rat multispecific organic anion transporter 1 (OAT1) transports zidovudine, acyclovir and antiviral nucleoside analogs."J.Pharmacol.Exp.Ther.. 294. 844-849 (2000)
[Publications] Kanai,Y: "Amino acid transporters : molecular structure and physiological roles."Nephrology, Dialysis, Transplantation. 15[Suppl 6]. 9-10 (2000)
[Publications] Matsuo,H: "Expression of a system L neutral amino acid transporter at the blood-brain barrier."Neuroreport. 11. 3507-3511 (2000)
[Publications] Tsuganezawa,H: "A new member of the HCO3-transporter superfamily is an apical anion exchanger of β-Intercalated Cells in the kidney."J Biol.Chem.. (in press). (2001)
[Publications] Mizoguchi,K: "Human cystinuria-related transporter : localization and functional characterization."Kidney Int.. (in press). (2001)
[Publications] Kim,DK: "Expression cloning of a Na+-independent aromatic amino acid transporter with structural similarity to H+/monocarboxylate transporters."J Biol.Chem.. (in press). (2001)
[Publications] Cha,SH,: "Identification and characterization of human organic anion transporter 3 expressing predominantly in the kidney."Mol.Pharmacol.. (in press). (2001)
[Publications] 金井好克: "グルタミン酸トランスポーターの機能特性"Brain Medical. 12. 161-168 (2000)
[Publications] 金井好克: "アミノ酸トランスポーター:基質認識の多様性を生みだす分子基盤シリーズ・ニューバイオフィジックスII:第3巻「ポンプとトランスポーター」、平田菜、茂木立志編."共立出版. 160-178 (2000)
[Publications] Kanai,Y: "The family of amino acid transporters associated with type II membrane glycoproteins : the roles in epithelial transport and cellular nutrition.Control and diseses of sodium dependent transport proteins and ion channels"."Elsevier Science B.V.. 311-314 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

アニオン性薬物トランスポーターのクローニングと薬物動態解析への応用

Principal Investigator

金井 好克 杏林大学, 医学部, 助教授 (60204533)

Research Products

[Publications] Fukasawa,Y: "Identification and characterization of a Na+-independent neutral amino acid transporter that associates with the 4F2 heavy chain and exhibits substrate selectivity for small neutral D-and L-amino acids."J.Biol.Chem.. 275. 9690-9698 (2000)

[Publications] Nakajima,N: "Developmental changes in multispecific organic anion transporter 1 expression in the rat kidney."Kidney Int.. 57. 1608-1616 (2000)

[Publications] Kanai,Y.: "Transport properties of a system y+L neutral and basic amino acid transporter : Insights into the mechanisms of substrate recognition."J.Biol.Chem.. 275. 20787-20793 (2000)

[Publications] Nakauchi,J: "Cloning and characterization of a human brain Na+-independent transporter for small neutral amino acids that transports D-serine with high affinity."Neurosci.Lett.. 287. 231-238 (2000)

[Publications] Ishii,H: "Involvement of rBAT in Na+ -dependent and -independent transport of the neurotransmitter candidate L-DOPA in Xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium poly A+RNA."Biochim.Biophys.Acta. 1466. 61-70 (2000)

[Publications] Matsuo,H: "Mouse A sc-1(asc-type amino acid transporter 1) maps to chromosome 7,region B1-B5."Chromosome Res.. 8. 456 (2000)

[Publications] Wada,S: "Rat multispecific organic anion transporter 1 (OAT1) transports zidovudine, acyclovir and antiviral nucleoside analogs."J.Pharmacol.Exp.Ther.. 294. 844-849 (2000)

[Publications] Kanai,Y: "Amino acid transporters : molecular structure and physiological roles."Nephrology, Dialysis, Transplantation. 15[Suppl 6]. 9-10 (2000)

[Publications] Matsuo,H: "Expression of a system L neutral amino acid transporter at the blood-brain barrier."Neuroreport. 11. 3507-3511 (2000)

[Publications] Tsuganezawa,H: "A new member of the HCO3-transporter superfamily is an apical anion exchanger of β-Intercalated Cells in the kidney."J Biol.Chem.. (in press). (2001)

[Publications] Mizoguchi,K: "Human cystinuria-related transporter : localization and functional characterization."Kidney Int.. (in press). (2001)

[Publications] Kim,DK: "Expression cloning of a Na+-independent aromatic amino acid transporter with structural similarity to H+/monocarboxylate transporters."J Biol.Chem.. (in press). (2001)

[Publications] Cha,SH,: "Identification and characterization of human organic anion transporter 3 expressing predominantly in the kidney."Mol.Pharmacol.. (in press). (2001)

[Publications] 金井好克: "グルタミン酸トランスポーターの機能特性"Brain Medical. 12. 161-168 (2000)

[Publications] 金井好克: "アミノ酸トランスポーター:基質認識の多様性を生みだす分子基盤シリーズ・ニューバイオフィジックスII:第3巻「ポンプとトランスポーター」、平田菜、茂木立志編."共立出版. 160-178 (2000)

[Publications] Kanai,Y: "The family of amino acid transporters associated with type II membrane glycoproteins : the roles in epithelial transport and cellular nutrition.Control and diseses of sodium dependent transport proteins and ion channels"."Elsevier Science B.V.. 311-314 (2000)

金井好克杏林大学, 医学部, 助教授 (60204533)