Reg遺伝子ファミリー全欠損による再生不全疾患モデル動物の開発

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11557009
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 那谷 耕司 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (90202233)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 加藤 一郎 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (50250741) ; 高沢 伸 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (50187944)
• Keywords: Reg / 再生遺伝子 / Pancreatic islet β-cells / Regeneration / 遺伝子ファミリー / 糖尿病 / Cre-lox P システム / BACクローン

Research Abstract

本研究の目的は、膵β細胞や神経組織の再生・増殖に関与しているRegファミリーの遺伝子を全て欠失したマウスを作製し、Regファミリーの機能を解析すると共に、このReg遺伝子ファミリー欠損マウスを組織再生不全の新たなモデル動物として開発することである。平成11年度の研究では以下のように期待された成果が得られた。
(1) 申請者らのこれまでの研究により、マウスRegファミリーの既知の5つの遺伝子(Reg I,Reg II,Reg IIIα,Reg IIIβ,Reg IIIγ)は第6染色体C/D領域に局在することが明らかとなっている。そこでこれらの遺伝子を含むBACクローンを単離した。
(2) (1)で単離したBACクローンをSouthern blot法、PCR法により解析したところ、マウスRegファミリー遺伝子は染色体上の約75kbpの領域に5'-側からReg IIIβ-Reg IIIα-Reg II-Reg I-Reg IIIγの順にクラスターを形成して存在しており、Reg IIIγの転写方向のみが他の遺伝子とは逆向きであることが明らかとなった。またそれぞれの遺伝子間の距離はReg IIIβとReg IIIαの間が6.8kbp、Reg IIIαとReg IIの間が14.6kbp、Reg IIとReg Iの間が14kbp、Reg IとReg IIIγの間が20kbpであった。
以上の解析結果を基に、現在Reg IIIβ遺伝子とReg IIIγ遺伝子の5'上流域にlox P配列が挿入されたノックアウト用ベクターを作製中である。

Research Products

• [Publications] Michiaki Abe: "Identification of a novel Reg family gene, Reg IIIδ, and mapping of all three types of Reg family gene in a 75 kilobase mouse genomic region"GENE. (in press). (2000)
• [Publications] Seiichi Kobayashi: "Identification of a receptor for Reg (Regenerating Gene) protein, a pancreatic beta-cell regeneration factor"Journal of Biological Chemistry. (in press). (2000)
• [Publications] Hiroshi Okamoto: "Transcriptional activation of Reg (Regenerating gene) by nicotinamide"Diabetes. 49(in press). (2000)
• [Publications] Hiroshi Okamoto: "Isolation and functional expression of a receptor for Reg protein"Diabetes. 49(in press). (2000)
• [Publications] Yasuhiko Yamamoto: "Roles of the AGE-RAGE system in vascular injury in diabetes"Annals of New York Academy of Sciences. (in press). (2000)
• [Publications] Hiroshi Okamoto: "Autoantibody against REG I protein in NIDDM patients"Diabetes. 48・Suppl.1. A444-A444 (1999)
• [Publications] Cinzia pupilli: "Autoantibodies to CD38 (ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase) in Caucasian patients with diabetes: effects on insulin release from human islets"Diabetes. 48・12. 2309-2315 (1999)
• [Publications] Ichiro Kato: "CD38 disruption impairs glucose-induced increases in cyclic ADP-ribose, [Ca^<2+>i, and insulin secretion"Journal of Biological Chemistry. 274・4. 1869-1872 (1999)
• [Publications] H.Kamii: "Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZu-superoxide dismutase"Stroke. 30・4. 867-871 (1999)
• [Publications] 高沢 伸: "糖尿病患者における抗REG I自己抗体の存在"糖尿病. 42・suppl.1. S111-S111 (1999)
• [Publications] 松井加奈: "PCR-RFLP法によるCD38遺伝子変異の検出"糖尿病. 42・suppl.1. S157-S157 (1999)
• [Publications] 阿部倫明: "新しい Reg 遺伝子(Reg IIIδ)の発見 その構造決定とマウス Reg ファミリー遺伝子地図の作製"糖尿病. 42・suppl.1. S163-S163 (1999)
• [Publications] 山本靖彦: "ヒト RAGE をトランスジーンとしたマウスの糖尿病性腎病変"糖尿病. 42・suppl.1. S194-S194 (1999)
• [Publications] 唐沢忠宏: "レンサ球菌cyclic ADP-ribose(cADPR)合成・分解酵素の構造決定と酵素活性に必須のアミノ酸残基"生化学. 71・8. 899-899 (1999)
• [Publications] 黒木実智雄: "膵ランゲルハンス島で発現している新しいリアノジン型受容体の構造、発現、機能"生化学. 71・8. 900-900 (1999)
• [Publications] 山本靖彦: "糖尿病性腎症発症進展に関わる分子の解明・トランスジェニックマウスを用いた検討"生化学. 71・8. 982-982 (1999)
• [Publications] 福士靖江: "CD38欠損マウス膵腺房細胞でのムスカリン性カルシウム応答"生化学. 71・8. 900-900 (1999)
• [Publications] 加藤一郎: "遺伝子改変マウスを用いた糖尿病の病態解析"生化学. 71・11. 1357-1357 (1999)
• [Publications] 黒木実智雄: "新規シアノジン型受容体の構造、発現と機能"生化学. 71・11. 1360-1360 (1999)
• [Publications] 秋山貴子: "ニコチン酸アミドの Reg 遺伝子発現増強効果"糖尿病. 43・suppl.1(印刷中). (2000)
• [Publications] 劉 一: "新規ヒトREGファミリー遺伝子(REG III)の発見:その構造、発現、染色体座位"糖尿病. 43・suppl.1(印刷中). (2000)
• [Publications] 小林誠一: "Reg蛋白質受容体の単離:その構造と機能発現"糖尿病. 43・suppl.1(印刷中). (2000)
• [Publications] Hiroshi Okamoto: "Human CD38 and related molecules"Kapil Mehta and Fabio Malavasi (KARGER). 24 (2000)
• [Publications] 森泉茂樹: "別冊医学の歩み 消化器疾患 II. 肝・胆・膵"玉熊正悦、石井浩正(医歯薬出版). 5 (1999)