C型肝炎ウイルス感染複製阻害および病態制御法の開発

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11557025
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• Principal Investigator: 小原 道法 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (10250218)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤田 尚志 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (10156870) ; 米川 博通 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (30142110) ; 小原 恭子 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (20225478) ; 土屋 政幸 中外製薬株式会社, 創薬資源研究所, 研究員 ; 豊田 哲也 久留米大学, 医学部, 教授 (00197972)
• Keywords: C型肝炎ウイルス / インターフェロン / シグナル伝達 / HCV cDNAクローン

Research Abstract

C型肝炎ウイルス(HCV)感染に対してインターフェロン(IFN)の有効性が認められているが、HCVの感染複製過程におけるインターフェロン作用機構は未だ全く明らかになっていない。そこで、HCV感染とIFNシグナル伝達について解析を行った。まず、Real-Time-Detection PCR法により、2-5AS、PKR、IFNシグナル伝達に関わるIFNa/b受容体、JAB、CIS3、IRF-1、IRF-2分子のmRNA発現量を解析し、IFN治療成績、HCV遺伝子型などとの比較を行った。肝生検サンプルを材料にした検討では、IFN a/b Receptor発現量は、著効群では有効群および無効群に比較して有意に高く、また、JAB、CIS3、IRF-1、IRF-2の発現も高い傾向が認められ、IFNシグナル伝達系全体が亢進している可能性が示唆された。
また、HCV全長遺伝子発現時における2-5ASならびにPKRのmRNA量の変化をHCV感受性のIMY細胞および非感受性であるHepG2細胞で比較した。HepG2細胞では、HCV遺伝子発現により、発現増加が観察され、IFNシグナル伝達系が活性化されたと考えられたが、IMY細胞では、これらの反応が観察されなかった。また、HepG2は培養液中へのINF添加により2-5ASならびにPKRのmRNA量が増加するが、IMY細胞では変化しない。これらの結果よりHCV感受性とIFNシグナル伝達系との間に密接な関係がある可能性が示唆された。そこで、HCV発現細胞株を用いてHCV感染とIFNシグナルの関係に関する解析を進めている。

Research Products

• [Publications] T. Takeuchi: "Real-Time Detection System for Quantification of Hepatitis C Virus Genome"Gastroenterology. 116. 636-642 (1999)
• [Publications] M. Hirota: "Phosphorylation of Nonstructural 5A Protein of Hepatitis C Virus : HCV Group-Specific Hyperphosphorylation"Virology. 257. 130-137 (1999)
• [Publications] A. Abe: "Quantitation of hepatitis B virus genomic DNA by real time detection PCR"J. Clin. Micobiology. 37. 2899-2903 (1999)
• [Publications] A. Honda: "Hepatitis C virus structural proteins induce liver cell injury in transgenic mice"J. Med. Virol.. 59. 281-289 (1999)
• [Publications] A. Sabile: "Hepatitis C virus core protein binds to apolipoprotein All and its secretion is modulated by fibrates"Hepatology. 30. 1064-1076 (1999)
• [Publications] M. Kohara: "Hepatitis C virus replication and pathogenesis"J. Dermatological Science. 22. 161-168 (2000)