1999 Fiscal Year Annual Research Report
酸化LDL受容体(CD36)阻害による新しい動脈硬化治療法の開発
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11557055
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
山下 静也 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (60243242)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
酒井 尚彦 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80294073)
中村 正 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (90252668)
富山 佳昭 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80252667)
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| Keywords | 酸化LDL受容体 / CD36 / 動脈硬化 / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
CD36は88kDの糖蛋白で血小板、単球、マクロファージ、脂肪細胞の細胞膜に存在し、コラーゲンやトロンボスポンジンの受容体であることが報告されていた。私共はCD36欠損症を発見し、遺伝子変位を同定するとともに、CD36欠損症患者のマクロファージを用いた実験により、患者由来マクロファージでは酸化LDLの結合が約50%低下していたことから、CD36がマクロファージにおける酸化LDLの受容体として粥状動脈硬化の発症課程で重要であること明らかにした。また、ヒト大動脈の粥状硬化巣でCD36が強く発現し、とくに泡沫化の強いマクロファージでの顕著な発現が認められ、スカベンジャー受容体Class A(SRA) の分布とは異なることを見出した。本研究ではかかるCD36に関する細胞及び分子生物学的研究を基盤に、まずマクロファージにCD36を過剰発現するマウスの作製を試みた。SRAプロモーターとヒトCD36cDNAを含むfragmentをマウス受精卵にmicroinjectionし、CD36過剰発現F1マウスを作成した。32匹をスクリーニングした結果、2匹でCD36発現を得ることができ、交配を試みたが、不妊のため、F2マウスを得ることができなかった。不妊の原因は不明であるが、CD36過剰発現との関連も示唆される。そこで、動脈硬化巣の単球由来マクロファージにおけるCD36の発現を抗CD36モノクローナル抗体の反復注射によるin vivoでのCD36抑制を介して、酸化LDLのマクロファージ内への取り込みを抑制し、泡沫細胞形成を抑制することによる粥状動脈硬化症の新しい治療法を開発することを試みた。この目的のため、マウスCD36に対するモノクローナル抗体の作製を試みており、現在までに数種類が得られている。今後、マウスマクロファージの培養系に上記のCD36抗体を添加し、酸化LDLの結合、取り込み、マクロファージの泡沫化抑制の有無を検討し、さらにLDL受容体欠損マウスに抗マウスCD36抗体を反復注射し、酸化LDLのin vivoでの結合抑制及びマクロファージの泡沫化抑制、動脈硬化巣の変化について検討する予定である。
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[Publications] T.Yoshizumi, S.Yamashita. et al.: "Pharmacokinetics metabolism of iodine-123-BMIPP fatty acid analogue in normal and CD36-deficient subjects"Radiology. 211. 283-286 (1999)
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[Publications] K.Fukuchi, S.Yamashita, et al.: "Enhanced myocardial glucose uptake in individuals with a deficiency in long-chain fatty acid transport(CD36 deficiency)"J Nucl Med. 40. 239-243 (1999)
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[Publications] S.Nozaki, S.Yamashita et al.: "CD36 mediates long-chain fatty acid transport in human myocardium: complete myocardial accumulation defect of radiolabeled long-chain fatty acid analog in subjects with CD36 deficiency"Mol Cell Biochem. 192. 129-135 (1999)
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[Publications] A.Nakata, M.Nishida et al.: "CD36, a novel receptor for oxidized low density lipoproteins, is highly expressed on lipid-laden macrophages in human atherosclerotic aorta"Arterioscler Thromb Vasc Biol. 19. 1333-1339 (1999)
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[Publications] K.Hirano S.Yamashita et al.: "Expression of human scavenger receptor class B type I(SR-BI) in cultured human monocyte-derived macrophages and atherosclerotic lesions"Circ Res. 8. 108-116 (1999)
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[Publications] T.Nakagawa,, S.Yamashita et al.: "Oxidized LDL increases and interferon-g decreases expression of CD36 in human monocyte-derived macrophages"Arterioscler Thromb Vasc Biol. 18. 1350-1357 (1998)
