1999 Fiscal Year Annual Research Report

臓器移植における免疫関連因子のアンチセンスペプチドの応用

Research Project

Project/Area Number	11557083
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	横山逸男名古屋大学, 医学部, 講師 (60240206)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	波井康名古屋大学, 医学部, 医員林衆治名古屋大学, 医学部, 助手 (30218573)
Keywords	Fas / Bax / bcl-2 / Caspase / Fasリガンド / アデノウィルス / リポゾーム / エンドベータガラクトシダーゼ
Research Abstract	discordan異種移植に伴う血管内皮細胞の細胞死のメカニズムを、細胞表面レセプター、カスパーゼ系酵素反応とシグナル伝達、活性酸素そしてアポートシス誘導因子(Bax、p53、Fas)および抑制因子(bcl-2、SOD:super oxide dismutase、Caspase inhibitor)につき詳細な検討を行った。異種臓器の血管内皮細胞では、特にBaxおよびbcl-2の発現がアポトシース誘導に深いつながりがあることがわかった。そこでアポトーシスの誘導を強く抑制したbcl-2について、異種動物の血管内皮細胞に発現すべく、遺伝子導入の基礎実験をおこなった。またフリーラジカルによる血管内皮細胞の障害にもアポトーシスが関与しているという知見から、SODのin vivoにおける遺伝子導入の可能性についても調べた。それによれば、血管内皮細胞は、アデノウィルスおよびポリゾームをベクターとして高率に誘導が可能であったため、in vivoへの応用の基盤が得られた。異種臓器に発現している糖鎖抗原をその発現酵素を制御して抑制する手段が試みられているが、特に大動物では困難であることが示されている。我々は独自の方法として、ガラクトースを消化する酵素の存在に着目し、エンドベータガラクトシダーゼの遺伝子解析を行った。現時点ではこの遺伝子をウィルス等のベクターを用いて、異種臓器に発現すべく遺伝子操作の基礎実験を行っている段階である。In vitroでの初期実験の結果ではこの酵素の有用性が示唆されている Fasレセプターの遺伝子クローニングから、その活性抑制基-ペプチドのクローンを複数合成した。そのうち、既存のモノクローナル抗体よりも活性の強い、10のアミノ酸からなるFasリガンドについてその活性決定基であるペプチドの効果について研究した。それによればある種のペプチドでは細胞死を強く誘導し、一方他には直接関係しないものもあることがわかり、細胞死抑制の手段として利用しうることが示唆された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kojima T, Del Carpio CA, Tajiri H, Yoshikawa, Saga S, Yokoyama I: "Inhibition of complement-medited immune hemolysis by peptides derived from constant domain of immunoglobulin"Brief Communications. 637-638 (1999)
[Publications] Hayashi S, Yokoyama I, Namii Y, Emi N, Uchida K, Takagi H.: "Inhibition of hepatic metastasis in murine colon cancer transfected with tissue plasminogen activator gene."Cancer Gene Therapy. 6・4. 380-384 (1999)
[Publications] Hayakawa A, Yokoyama I, Tajiri H, Okamoto T, Nakashima I: "Protein Kinase C-dependent anti-apoptotic mechanism that is associated with high sensitivity to anti-Fas antibody in ovarian cancer cell lines"Cancer Letters. 140. 113-119 (1999)
[Publications] Yokoyama I, Negita M, Hayakawa A, Hayashi S, Kobayashi T, Namii Y, Nagasaka T, Takagi H: "Cytosolic calcium dynamics and free radical-induced apoptosis of the endothelial cells."Transplantation Proceedings. 31. 808-809 (1999)
[Publications] Morozumi K, Kobayashi T, Usami T, Oikawa T, Matsuda H, Yokoyama I, Takagi H: "Significance of histochemical expression of Hanganutzi-Deicher antigen in pig, baboon and human tissues."Transplantation Proceedings. 31・1/2. 942-944 (1999)
[Publications] Hayashi S, Namii Y, Mei G-L, Liu D-K, Yokoyama I, Hamada H, Takagi H,: "Effect of adenovirus-mediated gene transfer with CTLA4Ig gene in organ transplantation."Transplantation Proceedings. 31. 1944-1945 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

臓器移植における免疫関連因子のアンチセンスペプチドの応用

Principal Investigator

横山 逸男 名古屋大学, 医学部, 講師 (60240206)

Research Products

[Publications] Kojima T, Del Carpio CA, Tajiri H, Yoshikawa, Saga S, Yokoyama I: "Inhibition of complement-medited immune hemolysis by peptides derived from constant domain of immunoglobulin"Brief Communications. 637-638 (1999)

[Publications] Hayashi S, Yokoyama I, Namii Y, Emi N, Uchida K, Takagi H.: "Inhibition of hepatic metastasis in murine colon cancer transfected with tissue plasminogen activator gene."Cancer Gene Therapy. 6・4. 380-384 (1999)

[Publications] Hayakawa A, Yokoyama I, Tajiri H, Okamoto T, Nakashima I: "Protein Kinase C-dependent anti-apoptotic mechanism that is associated with high sensitivity to anti-Fas antibody in ovarian cancer cell lines"Cancer Letters. 140. 113-119 (1999)

[Publications] Yokoyama I, Negita M, Hayakawa A, Hayashi S, Kobayashi T, Namii Y, Nagasaka T, Takagi H: "Cytosolic calcium dynamics and free radical-induced apoptosis of the endothelial cells."Transplantation Proceedings. 31. 808-809 (1999)

[Publications] Morozumi K, Kobayashi T, Usami T, Oikawa T, Matsuda H, Yokoyama I, Takagi H: "Significance of histochemical expression of Hanganutzi-Deicher antigen in pig, baboon and human tissues."Transplantation Proceedings. 31・1/2. 942-944 (1999)

[Publications] Hayashi S, Namii Y, Mei G-L, Liu D-K, Yokoyama I, Hamada H, Takagi H,: "Effect of adenovirus-mediated gene transfer with CTLA4Ig gene in organ transplantation."Transplantation Proceedings. 31. 1944-1945 (1999)

横山逸男名古屋大学, 医学部, 講師 (60240206)