2000 Fiscal Year Annual Research Report

有機アニオントランスポーター遺伝子導入による「再構築人工肝細胞」の提唱と開発

Research Project

Project/Area Number	11557088
Research Institution	TOHOKU UNIVERSITY
Principal Investigator	海野倫明東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70282043)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	遠藤公人東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (70292315) 鈴木正徳東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (70206530) 阿部高明東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (80292209) 片寄友東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (20302151)
Keywords	トランスポーター / 胆汁酸 / 人工肝臓 / 敗血症 / 閉塞性黄疸 / 甲状腺ホルモン / ステロイドホルモン / プロスタグランジン
Research Abstract	肝臓の機能は、解毒抱合・胆汁分泌・蛋白合成など極めて多機能であるが、その解毒抱合・胆汁分泌に絞ってみると、一種の分子篩として機能している腎臓とは異なり,肝細胞膜上のトランスポーターが特異的にある種の分子を肝細胞内に取り込み,細胆管側ヘトランスポーターによって排泄される高度複合機能を有した細胞である。その機能の詳細は長年不明であったが,近年の分子生物学の進歩により、細胞膜上に存在する各種トランスポーターの構造と機能が明らかとなってきた。研究代表者らは、平成11年度に、ヒト肝臓特異的有機アニオントランスポーター,LST-1のクローニングに成功した。さらにこのLST-1のラットのカウンターパートであるrat lst-1(rlst-1)も単離した(Kakyo,M.et al.Gastroenterology)。平成12年度にはLST-1と相同性を有する肝特異的有機アニオントランスポーター,LST-2の単離に成功し報告した(Gastroenterology,in press)。このLST-1を肝臓由来細胞株HepG2に導入したHepG2/LST1細胞株を作成した。細胞よりmRNAを抽出しノーザンブロットを施行し、LST-1の発現を確認した。この細胞は培養液中に添加した[3H]taurocholateを対照群に比して約5倍取り込んだ。発現蛋白をより増加させるために我々はアデノウイルスベクターをもちいて、LST-1およびLST-2を過剰発現させる系の開発を行った。AdLST-1とAdLST-2を作成し、これを培養細胞系に感染させることにより、50倍から100倍のtaurocholateの取り込みが観察された。このアデノウイルス系を用いて、現在更なる検討を進めている。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Abe,T.,M. Unno, et al.: ""LST-2, a human liver-specific organic anion transporter determines methotrexate sensitivity in the gastrointestinal cancers.""Gastroenterology. (in press). (2001)
[Publications] Nishio,T.,H.Adachi, et al.: "Molecular identification of a rat novel organic anion transporter moatl, which transports prostaglandin D(2), leukotriene C(4), and taurocholate."Biochem Biophys Res Commun. 275(3). 831-8. (2000)
[Publications] Akiyama T.,Unno,M. et al.: "Activation of Reg gene, a gene for insulin-producing beta-cell regeneration : Poly (ADP-ribose) polymerase binds Reg promoter and regulates the transcription by autopoly (ADP-ribosyl) ation."Proc Natl Acad Sci USA. 98(1). 48-53 (2000)
[Publications] Kobayashi,S.,Unno,M., et al: "Identification of a receptor for reg (regenerating gene) protein, a pancreatic beta-cell regeneration factor"J Biol Chem. 275(15). 10723-61 (2000)
[Publications] 海野倫明,阿部高明ほか: "肝臓の胆汁酸トランスポーターとその機能"肝胆膵. 41(5). 727-35 (2000)
[Publications] 海野倫明,阿部高明ほか: "腸管に発現する有機アニオントランスポーターの単離と機能解析"消化と吸収. 23(1). 32-6 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

有機アニオントランスポーター遺伝子導入による「再構築人工肝細胞」の提唱と開発

Principal Investigator

海野 倫明 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70282043)

Research Products

[Publications] Abe,T.,M. Unno, et al.: ""LST-2, a human liver-specific organic anion transporter determines methotrexate sensitivity in the gastrointestinal cancers.""Gastroenterology. (in press). (2001)

[Publications] Nishio,T.,H.Adachi, et al.: "Molecular identification of a rat novel organic anion transporter moatl, which transports prostaglandin D(2), leukotriene C(4), and taurocholate."Biochem Biophys Res Commun. 275(3). 831-8. (2000)

[Publications] Akiyama T.,Unno,M. et al.: "Activation of Reg gene, a gene for insulin-producing beta-cell regeneration : Poly (ADP-ribose) polymerase binds Reg promoter and regulates the transcription by autopoly (ADP-ribosyl) ation."Proc Natl Acad Sci USA. 98(1). 48-53 (2000)

[Publications] Kobayashi,S.,Unno,M., et al: "Identification of a receptor for reg (regenerating gene) protein, a pancreatic beta-cell regeneration factor"J Biol Chem. 275(15). 10723-61 (2000)

[Publications] 海野倫明,阿部高明 ほか: "肝臓の胆汁酸トランスポーターとその機能"肝胆膵. 41(5). 727-35 (2000)

[Publications] 海野倫明,阿部高明 ほか: "腸管に発現する有機アニオントランスポーターの単離と機能解析"消化と吸収. 23(1). 32-6 (2000)

海野倫明東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (70282043)

[Publications] 海野倫明,阿部高明ほか: "肝臓の胆汁酸トランスポーターとその機能"肝胆膵. 41(5). 727-35 (2000)

[Publications] 海野倫明,阿部高明ほか: "腸管に発現する有機アニオントランスポーターの単離と機能解析"消化と吸収. 23(1). 32-6 (2000)