2000 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
11558068
|
|---|
| Research Institution | Tohoku University |
|---|
Principal Investigator |
菊池 英明 東北大学, 加齢医学研究所, 助教授 (60006111)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
馬場 恒夫 ダイセル化学工業(株), 生理活性研究所, 主任研究員
|
|---|
| Keywords | ダイオキシン / 免疫毒性 / T細胞 / カスパーゼ3 |
|---|
| Research Abstract |
ダイオキシンの毒性の中でも、免疫機能の低下が、我々人類を含めた哺乳動物にとって大きな問題となりつつある。ダイオキシン類化合物の免疫毒性を試験管内で評価する方法として、我々のグループによって樹立された細胞株の中から、低濃度のダイオキシンによってアポトーシスを起こす細胞株を見い出し、報告してきた。そこで、この細胞株を用いてアポトーシスを指標とした、ダイオキシン類化合物のヒトに対する免疫毒性を評価する、簡便にして定量的なシステムを開発してきた。
白血病T細胞を用いた免疫毒性検出系の大量サンプル処理システムに適したアポトーシス検出法を見い出すため、アポトーシス検出感度の高く、低バックグラウンドの検出系を検討した。特に、検出感度の高い方法として、カスパーゼ3活性測定法を検討した。白血病T細胞のアポトーシスの初期過程で、カスパーゼ3が活性化されることを確かめた。そこで、カスパーゼ3の基質に蛍光物質を結合した化合物を用いると、反応によって放出された蛍光物質は、励起光により蛍光を出すようになり、より感度の高い検出方法となり、10^5個の細胞で十分測定できることがわかった。迅速にかつ効率良く評価することが可能な96穴マイクロタイタープレートを用いた蛍光測定法半自動システムを購入し、大量のサンプルを高速大量に処理することが可能であることを検証した。
現在、ヒト白血病T細胞株のアポトーシス機構を、ダイオキシンが活性化する細胞内情報伝達系の成分を中心に検討を進めている。
|
Research Products
(6 results)
-
[Publications] Kikuchi,H. et.al.: "NADPH oxidase subunit, gp91 phox homologue, preferentially expressed in human colon epitherial cells."Gene. 254. 237-243 (2000)
-
[Publications] Kikuchi,H. et.al.: "Presence of omeprazole-sensitive gene product which is responsible for CYP1A1 induction in human HepG2 cells."Drug Metabolism Reviews,. 32. 69-69 (2000)
-
[Publications] 菊池英明: "リガンド非依存性のAhレセプター活性化機構"生化学. 72(2). 194-198 (2000)
-
[Publications] Kikuchi,H. et.al.: "Method for evaluation of immunotoxicity of dioxin compounds using human T-lymphoblastic cell line, L-MAT."Chemosphere. (in press).
-
[Publications] Hossain,A. et.al.: "Mechanism of TCDD-mediated apoptosis in human T-lymphoblastic cell lines."Organohalogen Compounds. 42. 417-420 (1999)
-
[Publications] Endo,Y. et.al.: "Enhancement by galactosamine of lipopolysaccharide(LPS)-induced tumour necrosis fantor production and lethality : its suppression by LPS pretreatme"Br.J.Pharmacol.. 128. 5-12 (1999)
