2000 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト血漿に含まれる微量タンパク質成分の高性能分離・分析法の開発に関する研究

Research Project

Project/Area Number	11640610
Research Institution	Ehime University
Principal Investigator	真鍋敬愛媛大学, 理学部, 教授 (60094281)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	島崎洋次愛媛大学, 理学部, 助手 (80284389)
Keywords	血漿タンパク質 / 2次元電気泳動 / キャピラリー電気泳動 / 等電点電気泳動 / SDS電気泳動 / 微量タンパク質 / 高性能分離 / 高性能分取
Research Abstract	2次元ゲル電気泳動法に工夫を加え、分離原理の組み合わせを4種用いることによって、ポリペプチドがDNAから合成されたのち、機能を持つタンパク質へと構成されてゆく過程を追跡できることを示した。また、この研究の過程で、非変性条件ではヒト血漿中に高分子量タンパク質として(恐らくImmunoglobulin類との複合体として)存在し、SDS存在下の2次元ゲル電気泳動で解離し低分子領域に検出される数十個のタンパク質群を検出した。これらはいずれもヒト血漿25μl中の含量が0.5μg以下であり、2次元ゲル電気泳動だけでは構造解析にかけられる量を分取あるいは抽出することは困難であった。一方、キャピラリー電気泳動の特徴を生かした2次元電気泳動によって、タンパク質を溶液状態で検出・定量しながら回収できることを確認した。これは、2次元ゲル電気泳動が原理的に手操作の過程を自動化することが難しく、高性能化、タンパク質処理量の増大などに向けての大きな改良が30年近く行われていない現状を克服できる可能性を示したものである。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 真鍋敬,水摩仁美,渡部賢二: "A Non-Denaturing Protein Map of Human Plasma Proteins Correlated with a Denaturing Polypeptide Map Combining Techniques of Micro Two"Electrophoresis. 20. 830-835 (1999)
[Publications] 島崎洋次,小原清一,真鍋敬: "Protein Spot Recognition on the Non-Denaturing and Denaturing Two-Dimensioned Electrophoresis Patterus Using in situ Immuno-subtract"J.Biochem.Biophys, Methods. 39. 179-184 (1999)
[Publications] 真鍋敬,宮本洋光,井上かおり他: "Separation of Human Cerebrospinal Fluid Proteins by Capillary Isoelectricfocusing in the Absence of Denaturing Agents."Electrophoresis. 20. 3677-3683 (1999)
[Publications] 真鍋敬: "Capillary Electrophoresis of Proteins for Proteomic Studies"Electrophoresis. 20. 3116-3121 (1999)
[Publications] 真鍋敬: "Combination of Electrophoretic Techniques for comprehensive Analysis of Complex protein in Systems"Electrophoresis. 21. 1116-1121 (2001)
[Publications] 島崎洋次,室征芳,真鍋敬: "Selection of an Effective Enzyme for Digestion of non-Denaturing Proteins Using-Microscale Two-dimensioned"Clin.Chim.Acta. 302. 221-224 (2000)
[Publications] 真鍋敬: "最新電気泳動実験法(分担執筆)"医歯薬出版. 470(9) (1999)
[Publications] 真鍋敬: "実験医学別冊,ポストゲノム時代の実験講座2"羊土社. 282(15) (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト血漿に含まれる微量タンパク質成分の高性能分離・分析法の開発に関する研究

Principal Investigator

真鍋 敬 愛媛大学, 理学部, 教授 (60094281)

Research Products

[Publications] 真鍋敬,水摩仁美,渡部賢二: "A Non-Denaturing Protein Map of Human Plasma Proteins Correlated with a Denaturing Polypeptide Map Combining Techniques of Micro Two"Electrophoresis. 20. 830-835 (1999)

[Publications] 島崎洋次,小原清一,真鍋敬: "Protein Spot Recognition on the Non-Denaturing and Denaturing Two-Dimensioned Electrophoresis Patterus Using in situ Immuno-subtract"J.Biochem.Biophys, Methods. 39. 179-184 (1999)

[Publications] 真鍋敬,宮本洋光,井上かおり 他: "Separation of Human Cerebrospinal Fluid Proteins by Capillary Isoelectricfocusing in the Absence of Denaturing Agents."Electrophoresis. 20. 3677-3683 (1999)

[Publications] 真鍋敬: "Capillary Electrophoresis of Proteins for Proteomic Studies"Electrophoresis. 20. 3116-3121 (1999)

[Publications] 真鍋敬: "Combination of Electrophoretic Techniques for comprehensive Analysis of Complex protein in Systems"Electrophoresis. 21. 1116-1121 (2001)

[Publications] 島崎洋次,室征芳,真鍋敬: "Selection of an Effective Enzyme for Digestion of non-Denaturing Proteins Using-Microscale Two-dimensioned"Clin.Chim.Acta. 302. 221-224 (2000)

[Publications] 真鍋敬: "最新電気泳動実験法(分担執筆)"医歯薬出版. 470(9) (1999)

[Publications] 真鍋敬: "実験医学別冊,ポストゲノム時代の実験講座2"羊土社. 282(15) (2000)

真鍋敬愛媛大学, 理学部, 教授 (60094281)

[Publications] 真鍋敬,宮本洋光,井上かおり他: "Separation of Human Cerebrospinal Fluid Proteins by Capillary Isoelectricfocusing in the Absence of Denaturing Agents."Electrophoresis. 20. 3677-3683 (1999)