2000 Fiscal Year Annual Research Report

不和合性群Iプラスミドの接合伝達遺伝子群の解析

Research Project

Project/Area Number	11640622
Research Institution	Tokyo Metropolitan University
Principal Investigator	駒野照弥東京都立大学, 理学研究科, 教授 (00087131)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	古屋伸久東京都立大学, 理学研究科, 助手 (50244413)
Keywords	Inclプラスミド / 接合伝達 / IV型線毛 / シャフロン / oriTオペロン
Research Abstract	プラスミドR64の接合伝達領域は、54kbのDNA領域に49個の遺伝子を含む極めて複雑な遺伝子構成を示す。細・太2種の線毛を産生し、IV型線毛である細線毛の先端に局在するPilVアドヘシンのC末端部はシャフロンのDNA再編成により7種に変換する-等の特徴を示す。本研究ではR64,Collb-P9,R721およびR621aのInclプラスミドの接合伝達遺伝子群の機能を遺伝生化学的に明らかにするとともに、各遺伝子産物を同定し、細胞内局在性を決定することを目的とした。1)R64の各種pilおよびtra遺伝子を大量発現させ、その産物を精製し、その性質を調べるとともに抗体を作成した。pilN産物が外膜でセクレチン様リング構造体を形成すること、pilQ産物が多量体を形成しATPase活性を示すことを明らかにした。またpilKMOPRTおよびtraMN産物の細胞内局在を決定した。2)シャフロンに関する研究では、各種非対称組換え部位の保存されていない配列が組換え頻度に大きく影響することを明らかにした。また各種PilVアドヘシンが、受容菌表層に存在する受容体であるリポ多糖に特異的に結合することをブロット法で明らかにした。3)PilVアドヘシンとPilSピリンの変異株を分離し、これらタンパクの構造と機能の関係、さらに両タンパクの相互作用を解析した。4)R64のoriTオペロンは、oriT配列とnikAB遺伝子から成り立つ。今回はNikBタンパクを精製し、oriTとの相互作用を調べた。5)InclγプラスミドR621aの接合伝達領域の構造がR64のそれとよく似ていることを明かにした。しかしR621a,R64では、exc遺伝子は異なり、異なる排斥グループに属していた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Komano et al.: "The transfer region of Incl1 plasmid R64 : similarities between R64 tra and Leqionella icm/dot genes."Molecular Microbiology. 35. 1348-1359 (2000)
[Publications] Furuya and Komano: "Initiation and termination of DNA transfer during conjugation of lncl1 plasmid R64 : the role of two sets of inverted repeat sequences."Journal of Bacteriology. 182. 3191-3196 (2000)
[Publications] Gyohda and Komano: "Purification and characterization of the R64 shufflon-specific recombinase."Journal of Bacteriology. 182. 2782-2792 (2000)
[Publications] Ishiwa and Komano: "The lipopolysacchaide of recipient cells is a specific receptor for PilV proteins, selected by shufflon DNA rearrangement."Molecular and General Genetics. 263. 159-164 (2000)
[Publications] Sakai and Komano: "The pilL and pilN genes of Incl1 plasmids R64 and Collb-P9 encode outer membrane lipoproteins responsible for thin pilus biogenesis."Plasmid. 43. 149-152 (2000)
[Publications] Komano: "Shufflons : multiple inversion systems and integrons."Annual Review of Genetics. 33. 171-191 (1999)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

不和合性群Iプラスミドの接合伝達遺伝子群の解析

Principal Investigator

駒野 照弥 東京都立大学, 理学研究科, 教授 (00087131)

Research Products

[Publications] Komano et al.: "The transfer region of Incl1 plasmid R64 : similarities between R64 tra and Leqionella icm/dot genes."Molecular Microbiology. 35. 1348-1359 (2000)

[Publications] Furuya and Komano: "Initiation and termination of DNA transfer during conjugation of lncl1 plasmid R64 : the role of two sets of inverted repeat sequences."Journal of Bacteriology. 182. 3191-3196 (2000)

[Publications] Gyohda and Komano: "Purification and characterization of the R64 shufflon-specific recombinase."Journal of Bacteriology. 182. 2782-2792 (2000)

[Publications] Ishiwa and Komano: "The lipopolysacchaide of recipient cells is a specific receptor for PilV proteins, selected by shufflon DNA rearrangement."Molecular and General Genetics. 263. 159-164 (2000)

[Publications] Sakai and Komano: "The pilL and pilN genes of Incl1 plasmids R64 and Collb-P9 encode outer membrane lipoproteins responsible for thin pilus biogenesis."Plasmid. 43. 149-152 (2000)

[Publications] Komano: "Shufflons : multiple inversion systems and integrons."Annual Review of Genetics. 33. 171-191 (1999)

駒野照弥東京都立大学, 理学研究科, 教授 (00087131)