ヒトデ卵成熟に関わるホルモン、生殖巣刺激物質(GSS)と1-メチルアデニンの研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11640672
• Research Institution: Teikyo Junior College
• Principal Investigator: 三田 雅敏 帝京短期大学, 生活科学科, 講師 (50190674)
• Keywords: 卵成熟 / 生殖巣刺激物質 / ゴナドトロピン受容体遺伝子 / 1-メチルアデニン / 卵濾胞細胞 / イトマキヒトデ

Research Abstract

1.GSSレセプターのcDNAクローニング:繁殖期のイトマキヒトデ卵巣から調整したmRNAから哺乳類のゴナドトロピン受容体に共通にみられるアミノ酸配列をもつcDNAがクローニングされた(Comp.Biochem.Physiol.,1999,124A : S72,Zygote,2000,印刷中)。
2.1-メチルアデニンの生合成過程と活性調節:単離した卵濾胞細胞に[^<14>C-methyl]メチオニンあるいは[U-^<14>C]アデニンまたは[U-^<14>C]アデノシンを取り込ませたトレーサー実験により、新たに2つの事実が得られた。すなわち、1-MeA生合成の直接のメチルドナーがS-アデノシルメチオニン(SAM)であったこと(Mo1.Reprod.Develop.,1999、54 : 63-68)、およびアデニン骨格がATPに由来していたことである(Biochim.Biophys.Acta,1999,1428 : 13-20)。また、無細胞系においてもATPとSAMを基質にしてサイクリックAMP濃度に依存して1-MeAが合成されることが見出された(Zygote,2000,印刷中)。
3.1-メチルアデニン受容体:12種類のN^1置換アデニン類を化学的に合成し、ヒトデ卵成熟に対するアゴニストおよびアンタゴニストの作用を調べた。その結果、1-MeAレセプタータンパクに対する相互作用において、分子内の電荷ばかりでなく、N^1置換基の立体的位置関係が重要であることが明らかにされた(帝京短期大学紀要1999,11:13-17)。
その他、卵濾胞細胞表面に存在するATP-diphosphohydrolase(ATPDase,apyrase)の部分精製を行い、その性質の一部を明らかにした(Ecto-ATPases and Related Ectonucleases,2000,338)。

Research Products

• [Publications] Masatoshi Mita: "1-Methyladenine production from ATP by starfish ovarian follicle cells"Biochim.Biophys.Acta. 1428. 13-20 (1999)
• [Publications] Masatoshi Mita: "A methylation for 1-methyladenine biosynthesis in starfish ovarian follicle cells"Mol.Reprod.Develop. 54. 63-68 (1999)
• [Publications] 三田雅敏: "1-ニトロベンジルアデニン位置異性体によるヒトデ卵成熟誘起作用の解析"帝京短期大学紀要. 11. 13-17 (1999)
• [Publications] Toshiaki Hirai: "cDNA cloning of GTH receptor family in ovaries of the starfish Asterina pectinifera"Comp.Biochem.Physiol. 124A. S72 (1999)
• [Publications] Masatoshi Mita: "1-Methyladenine : A starfish oocyte maturation-inducing substance"Zygote. (発表予定). (2000)
• [Publications] Toshiaki Hirai: "cDNA cloning of GTH receptor family in starfish ovaries"Zygote. (発表予定). (2000)
• [Publications] Masatoshi Mita: "Ecto-ATPases and Related Ectonucleases"Luc Vanduffel & Raf Lemmens. 345 (2000)