2000 Fiscal Year Annual Research Report
酵母細胞における胞子形成過程及び各種変異株の超微細構造的三次元構築による解析
Project/Area Number |
11660073
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
平田 愛子 東京大学, 分子細胞生物研究所, 講師 (30092307)
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Keywords | 酵母 / 微細構造 / 減数分裂 / 3次元構築 |
Research Abstract |
胞子形成過程というのは、細胞融合、核融合、減数分裂DNA合成、第1減数分裂、第2減数分裂、子嚢胞子の形成、成熟、遊出の諸過程を経て進むため形態が激しく変化し、その過程には多くの遺伝子が関わっている。これらの遺伝子は減数分裂、胞子形成過程に特異的遺伝子の他に、栄養増殖時に働いている重要な遺伝子も含まれていることが分かってきた。これらの研究の基礎となる酵母の胞子形成過程における激しい形態変化の微細構造を知る目的で電子顕微鏡観察し、特に形態が複雑に変化する過程の三次元構築を行った。出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)と分裂酵母(Schizosaccharomyces pombe)を急速凍結置換固定し、連続切片を電子顕微鏡観察、写真撮影後、コンピューターにより、三次元構築を行った。分裂酵母の3次元構築は核融合前の間期、核融合直前、第一減数分裂前のDNA合成期の細胞について行った。これらの過程では細胞質微小管が細胞内に多数存在しており、核の周りから細胞の先端まで微小管が伸びたダイナッミックな動きを示した。特に、減数分裂前DNA合成期(horse tail)の核は通常のまるい核と異なり、複雑な形態となり、核の周りに多数の微小管が観察され、この三次元構築を回転させることにより、核の形態と微小管の関係がより鮮明になった。核内のスピンドル微小管は観察されなかった。一方、出芽酵母は核融合時はSPBから細胞質側の微小管と核内に微小管束が観察された。両酵母共、第二減数分裂でSPBの形態は変化し、分裂酵母は第一減数分裂後は核が2個に分かれ、第二減数分裂に入り、4個の核に分かれ、4個の胞子となった。出芽酵母の小胞体膜に存在するDnaJホモログであるJem1と同じくDnaJホモログで、小胞体膜に存在するSec63複合体構成遺伝子の変異株の核融合阻害時の三次元構築を行った。Jem1変異株のみ核の外膜が所々融合していたが、その他の変異株は外膜も内膜も融合していなかった。
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[Publications] Hironori Higashio: "Sfb2p.a yeast protein related to Sec24p.can function as a consticuent of COPII caots required for vesicle budding from the endoplasmic reticulum"J.Biol.Chem.. 275・23. 17900-17908 (2000)
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[Publications] Michiyo Ohno: "Symbiobacterium thermophilum gen.nov., sp.nov., a symbiotic thermophile that depends on co-culture withh a Bacillus strain for growth"Internat.J.System.Evolur.Microbiol.. 50・5. 1829-1832 (2000)
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[Publications] Maki Kawai: "Ion beam as a noble tool to induce apoptosis-like cell death in roots of maize (Zea mays L.)"Plant Biotech.. 17・4. 305-308 (2000)
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[Publications] Satoru Ishihara: "production of two-spored asci by a mutation in SPC encoding a component of the spindle pole body in Saccharomyces cecevisiae"Mol.Gen.Genet.. (in press). (2001)
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[Publications] Yukiko Nakase: "The S.pombe spo20^+ gene encoding a homologue of S.cerevisiae Sec 14 play an important role in forespore membrane formation"Mol.Biol.Cell. 12・4(in press). (2001)
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[Publications] Yoichi Kosodo: "Multicopy suppressors of the sly 1 tempreature-sensitive mutation in the ER-Golgi vesicular transport in Saccharomyces cerevisiae"Yeast in press. (2001)