2000 Fiscal Year Annual Research Report
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11660094
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
徳永 正雄 鹿児島大学, 農学部, 教授 (20112782)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石橋 松二郎 鹿児島大学, 農学部, 助手 (20305163)
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| Keywords | 好塩菌 / Nucleoside diphosphate Kinase / クローニング |
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| Research Abstract |
昨年度分離できた高度好塩菌由来Nucleoside diphosphate Kinase遺伝子断片(〜120bp)をプローブとして全長のクローニングを試みた。サザン解析により約9kbのKpnI断片を分離し、コロニーハイブリでスクリーニングしndk遺伝子のクローニングに成功した。483bpからなる分子量18065のORFをコードしていた。他生物のNDKに比べ酸性アミノ酸の含量が高く、好塩性酵素の特徴を示した。この遺伝子を大腸菌で発現させるため、T7プロモーター下流に組み込んだpETHsndkを構築した。精製NDKを用いた抗体を用いて、大腸菌での発現を確認した。現在、塩濃度と組換え型NDKの活性との関係を検討している。
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